2022年《國家食品安全監(jiān)督抽檢實施細則》(簡稱國抽)與2021年相比，畜禽肉及副產(chǎn)品和水產(chǎn)品項下的氯霉素檢驗項目中新增了《GB 31658.2-2021 食品安全國家標準 動物性食品中氯霉素殘留量的測定 液相色譜－串聯(lián)質(zhì)譜法》，同時，在1.5.2.4及3.5.2.5中指定其為2022年2月1日(含)起的指定檢驗方法。

　　迪馬科技參考GB 31658.2-2021建立了SPE-UPLC-MS/MS法測定動物性食品中氯霉素殘留量，使用乙腈提取，乙酸乙酯反萃，Diamonsil C18(2)色譜柱分離檢測；定量限與標準方法一致，為0.1μg/kg；回收率在80%-110%之間。實驗過程基本參考標準，本方法回收率高，穩(wěn)定性好，通過對C18小柱的考察，最 終采用ProElut C18-U凈化，可供大家參考。

1、適用范圍：

本方案適用于豬肉、雞肉、豬肝和雞肝等樣品中氯霉素殘留量的檢測。

2、標準品配制：

(1)氯霉素儲備液0.1mg/mL: 準確稱取適量標準品，用甲醇配制成氯霉素0.1mg/mL的儲備液；

(2)氯霉素標準工作液: 吸取適量氯霉素儲備液，用流動相稀釋成0.01μg/mL和0.05μg/mL；

(3)氯霉素內(nèi)標儲備液100.0μg/mL: 稱取適量氯霉素-D5(CAS#: 202480-68-0)，用甲醇配制；

(4)氯霉素內(nèi)標工作液: 吸取適量內(nèi)標儲備液，用流動相稀釋成0.02μg/mL。

3、提取：

(1)稱取5.0g樣品，加入氯霉素內(nèi)標工作液250μL、5mL乙腈和5mL 4%氯化鈉溶液，渦旋振蕩2min，6000rpm離心2min，取上清液；

(2)向下層殘渣中繼續(xù)加入5mL乙腈和5mL 4%氯化鈉溶液，按照步驟(1)重復提取一次，合并兩次上清液；

(3)向上清液中加入正己烷5mL，渦旋1min，6000rpm離心2min，棄去上層液；再加入5mL正己烷重復處理1次；

(4)加水飽和的乙酸乙酯溶液5mL，渦旋1min，6000rpm離心2min，將上層清液轉(zhuǎn)移到氮吹管中，重復提取一次，合并提取液；

(5)40℃水浴下氮吹至近干(約0.2mL)，加5%乙腈水3mL溶解，混勻，待凈化。

4、凈化：

ProElut C18-U 500mg/6mL(Cat.#: 63505)

(1)活化:依次用10mL甲醇、10mL水活化；

(2)上樣:加入待凈化液，棄去流出液；控制流速1滴/秒；

(3)淋洗:加入6mL水淋洗，棄去流出液；

(4)洗脫:加入4mL 50%甲醇水, 控制流速1滴/秒，收集洗脫液；

(5)萃取:向洗脫液中加入水飽和的乙酸乙酯溶液4mL，渦旋1min，6000rpm離心2min，將上層清液轉(zhuǎn)移到氮吹管中，重復提取一次，合并上層溶液。

(6)重新溶解:將萃取得到的上層溶液在40℃水浴下氮吹至0.2mL，用50%甲醇水定至1mL，混勻，過Nylon膜(Cat.# 37177)，上機分析。

*注: 同方法制備基質(zhì)匹配標準溶液。

5、分析條件：

UPLC條件

色譜柱: Diamonsil C18(2)，150x3.0mm，5μm (Cat.#: 99628)

流速: 0.4mL/min

進樣量: 5μL

柱溫: 30℃

流動相: A:水 B:甲醇 A:B=1:1

質(zhì)譜條件

電離模式: ESI

掃描方式: 負離子掃描

檢測方式: 多反應監(jiān)測

電噴霧電壓: -4500V

霧化氣壓力: 50psi

輔助氣壓力: 50psi

氣簾氣壓力: 20psi

離子源溫度: 500℃

6 、添加回收結(jié)果及色譜圖：

相關產(chǎn)品信息