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Copure|豇豆和芹菜中滅蠅胺的測(cè)定

來源：深圳逗點(diǎn)生物技術(shù)有限公司      分類：應(yīng)用方案 2025-02-13 16:45:11 58閱讀次數(shù)
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     滅蠅胺是一種昆蟲生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑類低毒殺蟲劑，有非常強(qiáng)的選擇性，主要對(duì)雙翅目昆蟲有活性。其作用機(jī)理是使雙翅目昆蟲幼蟲和蛹在形態(tài)上發(fā)生畸變，導(dǎo)致成蟲羽化不全或受抑制；滅蠅胺適用于多種瓜果蔬菜，主要對(duì)“蠅類”害蟲具有良好的殺蟲作用。GB2763-2021食品中農(nóng)藥最大殘留限量標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定了豇豆和芹菜的最大殘留限量分別為0.5mg/kg和4mg/kg，同時(shí)滅蠅胺也作為全國(guó)食品安全監(jiān)督抽檢細(xì)則2024版中豇豆的必檢項(xiàng)目。本次實(shí)驗(yàn)參照標(biāo)準(zhǔn)NY/T 1725-2009《蔬菜水果中滅蠅胺的測(cè)定高效液相色譜法》對(duì)豇豆和芹菜樣品進(jìn)行不同濃度的加標(biāo)試驗(yàn)。

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 樣本前處理

1.樣品提取

稱取試樣20g于150mL三角瓶中，【加標(biāo)樣品加入適量的體積】，加入50mL乙酸銨-乙腈（1+4）溶液，渦旋混勻30s后超聲提取20min，將提取液全部轉(zhuǎn)移至離心管中5000r/min離心5min，收集全部上清液于100mL容量瓶中；殘?jiān)尤爰s30mL乙酸銨-乙腈（1+4）溶液再次超聲提取10min后,將提取液全部轉(zhuǎn)移至離心管中5000r/min離心5min，合并所有上清液，并用乙酸銨-乙腈（1+4）溶液定容至刻度，混合均勻。準(zhǔn)確移取10mL提取液45℃氮吹濃縮至2mL左右，加入2mL 0.1mol/L鹽酸溶液，超聲2-3min，渦旋混勻，作為待凈化液。

注：（1）濃縮盡量選擇氮吹，避免目標(biāo)物損失。（2）乙酸銨-乙腈（1+4）溶液：量取200mL乙酸銨溶液（0.05mol/L）至1L容量瓶中，用乙腈定容至刻度。

2. 凈化（Copure滅蠅胺專用固相萃取柱）

活化：分別用5mL甲醇、5mL水活化小柱

上樣：將上述待凈化液加入小柱中,再用3mL 0.1mol/L鹽酸溶液將氮吹管底部殘余物洗入小柱中

淋洗：依次用5mL水、5mL甲醇淋洗小柱，壓干小柱

洗脫：加入15mL 5%氨水甲醇，壓干小柱，收集洗脫液于氮吹管中，45℃氮吹至近干，加入2mL乙腈-水（95-5）溶液，超聲2-3min，渦旋復(fù)溶。過親水PTFE濾膜，上機(jī)測(cè)試。

2

 儀器條件

儀器：ThermoFisher U3000液相色譜儀

色譜柱: Copure滅蠅胺專用 HPLC 柱, NH2-S (4.6 mm×250 mm，5 μm)

流動(dòng)相：A：水；B：乙腈

洗脫方式：A：B=5:95 等度洗脫

流速：1 mL/min，柱溫：35 ℃，進(jìn)樣量：20μL

檢測(cè)器：紫外檢測(cè)器，檢測(cè)波長(zhǎng)：215 nm

注：氨基柱需要保證足夠長(zhǎng)的色譜柱平衡時(shí)間，氨基柱色譜柱廠家的不同，滅蠅胺出峰時(shí)間可能有差異，需適當(dāng)調(diào)整乙腈和水的比例，讓雜峰與目標(biāo)物有一定的分離度，建議滅蠅胺的保留時(shí)間在10-15min之間。

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 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

加標(biāo)回收


100ng/mL曲線滅蠅胺的液相色譜圖


豇豆本底中滅蠅胺液相色譜圖 


加標(biāo)濃度為0.2 mg/kg時(shí)豇豆中滅蠅胺液相色譜圖


加標(biāo)濃度為0.5 mg/kg時(shí)豇豆中滅蠅胺液相色譜圖


芹菜本底中滅蠅胺液相色譜圖


加標(biāo)濃度為0.2 mg/kg時(shí)芹菜中滅蠅胺液相色譜圖


加標(biāo)濃度為4 mg/kg時(shí)芹菜中滅蠅胺液相色譜圖

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 注意事項(xiàng)

1.豇豆基質(zhì)滅蠅胺本底一般有值，添加濃度盡量選擇5~10倍檢出限左右；

2.洗脫液為5%氨水甲醇，需注意氨水試劑的開封日期，盡量避免使用開封過久的氨水配制，洗脫液建議現(xiàn)配現(xiàn)用，避免氨水揮發(fā)后濃度不夠，造成洗脫不完全，回收率偏低。

3.樣品提取方式選擇均質(zhì)或者超聲都需要提取兩次以上，保證目標(biāo)物提取充分。

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