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2025-01-21 09:31:20磷酸鹽校正曲線: 磷酸鹽校正曲線是用于校準(zhǔn)或驗(yàn)證磷酸鹽濃度測(cè)量結(jié)果的圖形表示。通過(guò)一系列已知磷酸鹽濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液測(cè)量，繪制出吸光度或熒光強(qiáng)度與磷酸鹽濃度之間的關(guān)系曲線。此曲線有助于校正儀器誤差，提高測(cè)量準(zhǔn)確性。在環(huán)境監(jiān)測(cè)、水質(zhì)分析、生物學(xué)實(shí)驗(yàn)等領(lǐng)域，磷酸鹽校正曲線是確保數(shù)據(jù)可靠性的重要工具。

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磷酸鹽校正曲線問(wèn)答

2021-09-26 10:55:38Tris（77-86-1）與磷酸鹽緩沖液的選擇: Tris和磷酸鹽都是很常用的緩沖液，它們有相同的地方也有很多不同的地方，如何能在使用時(shí)正確分辨和選擇，這也是難倒了一批人。我們今天就先從它們各自的應(yīng)用及使用環(huán)境講起。讓你能很直觀的感受到它們的區(qū)別。Tris緩沖液在電泳緩沖液中同甘氨酸構(gòu)成緩沖體系穩(wěn)定pH值；在凝膠中使用Tris-HCl緩沖體系穩(wěn)定pH值；被廣泛用作核酸和蛋白質(zhì)的溶劑；Tris緩沖液的低離子強(qiáng)度特點(diǎn)還可用于線蟲(chóng)的中間纖維的形成；在Tris鹽酸緩沖液中加入EDTA制成“TE緩沖液”，可用于DNA的穩(wěn)定和存儲(chǔ)；將調(diào)節(jié)pH值的酸溶液換成乙酸，獲得“TAE緩沖液”，換成硼酸可獲得TBE緩沖液。這兩種緩沖液常用于核酸電泳實(shí)驗(yàn)中。磷酸鹽緩沖液一般的有活性的生物制劑都要用磷酸鹽緩沖溶液來(lái)稀釋。原因就是它具有鹽平衡、可調(diào)整適宜pH值的緩沖作用。蒸餾水不具有鹽平衡作用，會(huì)破壞生物蛋白的結(jié)構(gòu)及生物特性；生理鹽水不具有調(diào)整pH的作用，對(duì)完整的、有活性的物質(zhì)不能保證其在最適條件下參與生物反應(yīng)，所以使用PBS是先選。當(dāng)然，有的生物活性物質(zhì)需要的條件比較高，就需要在平衡緩沖液中加入更多的成分，維持合適的條件保證生物活性物質(zhì)保持其最完整的特性。因此PBS主要用于細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，其緩沖范圍最適宜在中性（7.0）。在生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)中要慎重地選擇緩沖溶液，不僅要考慮緩沖液的緩沖范圍，還要綜合考慮緩沖液的使用環(huán)境：1. 磷酸鹽緩沖溶液的緩沖范圍比較寬，但是它在pH7.5以上時(shí)緩沖能力很小；Tris本身呈堿性，可以只用Tris-HCl緩沖體系即可配制pH范圍由酸性到堿性的緩沖液，方法也較為簡(jiǎn)單，對(duì)于不同的實(shí)驗(yàn)，Tris還可以與其他物質(zhì)組成多種緩沖體系。2. 磷酸鹽緩沖溶液易與常見(jiàn)的Ca2+離子、Mg2+離子以及重金屬離子締合生成沉淀，同時(shí)會(huì)抑zhi某些生物化學(xué)過(guò)程以及多數(shù)酶的活性，包括激酶，磷酸化酶，脫氫酶等；相比之下Tris緩沖溶液對(duì)生物化學(xué)過(guò)程干擾很小，也不與鈣、鎂離子及重金屬離子發(fā)生沉淀。若反應(yīng)體系中存在金屬離子或者酶制劑，則以Tris緩沖溶液為較優(yōu)選擇。3. Tris緩沖液的pH值受溶液濃度影響較磷酸鹽緩沖溶液大，同樣稀釋十倍，磷酸鹽緩沖溶液的pH值變化小于0.1，而Tris緩沖液的pH值變化則大于0.1。因此對(duì)于體積變化較大的反應(yīng)體系，則應(yīng)慎重使用Tris 緩沖液。4. 另外，Tris緩沖溶液受環(huán)境影響較大。一般來(lái)說(shuō)，溫度每升高一度，pH值下降0.03；同時(shí)其易吸收空氣中的CO2，所以配制的緩沖液要蓋嚴(yán)密封。

2021-09-16 11:34:16磷酸鹽、TRIS、HEPES、PIPES緩沖劑的了解: 如何選擇緩沖劑？選擇緩沖體系，其解離常數(shù)pKa值應(yīng)該在設(shè)定的pH上下一個(gè)pH值單位內(nèi)，因?yàn)榫彌_液的pKa變化超過(guò)一個(gè)pH單位時(shí)，其緩沖能力就會(huì)明顯下降；緩沖體系不應(yīng)影響蛋白質(zhì)的活性或者DNA的穩(wěn)定性，并避免其他離子的干擾；另外，還要考慮溫度的影響：溫度不僅對(duì)緩沖液有影響，對(duì)細(xì)胞也有影響，大多數(shù)動(dòng)物細(xì)胞在37℃的生理狀況下pH為7.0~7.5，而在溫度下降到0℃時(shí)可達(dá)到8.0。一、磷酸鹽緩沖液的優(yōu)缺點(diǎn)：是使用很廣泛的一種緩沖劑，由于它有二級(jí)解離，所以緩沖的pH值范圍很廣，可配置各種pH值的酸性、堿性和中性緩沖液。優(yōu)點(diǎn)：易配成各種濃度適用pH范圍寬pH受溫度影響小稀釋后pH變化小缺點(diǎn)：易與常見(jiàn)的鈣離子、鎂離子及重金屬離子締合成沉淀。二、Tris緩沖液的優(yōu)缺點(diǎn)：Tris緩沖液是在生物化學(xué)研究中使用較廣泛的一種緩沖劑，其本身為弱堿，常用有效pH在“中性”范圍。優(yōu)點(diǎn)：堿性較強(qiáng)，可以只用這一種緩沖液配置由酸到堿的但范圍pH緩沖液；對(duì)生物化學(xué)過(guò)程干擾很小，不與鈣、鎂離子及重金屬離子發(fā)生沉淀；易吸收空氣中的CO2，所以配制的緩沖液要蓋嚴(yán)密封；此緩沖液對(duì)某些pH電極發(fā)生一定干擾作用，所以要使用與Tris溶液具有兼容性的電極。缺點(diǎn)：pH受濃度影響較大，稀釋10倍，pH變化大于0.1溫度效應(yīng)大，如4℃時(shí)pH=8.4，37℃時(shí)pH=7.4三、HEPES緩沖液的優(yōu)缺點(diǎn)：HEPES是一種非離子兩性緩沖液，其在pH7.2~7.4范圍內(nèi)具有較好的緩沖能力，常用在生化診斷試劑盒、DNA/RNA提取試劑盒及PCR診斷試劑盒里。優(yōu)點(diǎn)：在開(kāi)放式培養(yǎng)或細(xì)胞觀察時(shí)能維持較恒定的pH值，并對(duì)細(xì)胞無(wú)毒性作用。缺點(diǎn)：在高濃度時(shí)對(duì)一些細(xì)胞可能有毒，與其他緩沖劑相比價(jià)格略貴。四、PIPES緩沖液的優(yōu)缺點(diǎn)：PIPES是哌嗪緩沖液家族的一員，與HEPES屬于同一家族。它是兩性離子Good's緩沖液，在6.1至7.5的pH范圍內(nèi)有效。由于pH范圍與HEPES略有不同，PIPES的濃度僅為HEPES濃度的一半。優(yōu)點(diǎn)：該緩沖劑不會(huì)與金屬絡(luò)合，因此可用于含金屬離子的溶液；可以用于色譜分析，電子顯微鏡固定植物細(xì)胞，以及代替草甘膦緩沖液。缺點(diǎn)：當(dāng)溶液的pH值升高到6.5以上時(shí)，PIPES的游離酸才容易溶解，但是PIPES的鈉鹽很容易溶解；如果使用的是游離酸形式的緩沖液，請(qǐng)使用氫氧化鈉將其轉(zhuǎn)化為鈉鹽，以提高在較低pH下的溶解度；像HEPES一樣，PIPES不適用于涉及氧化還原反應(yīng)的實(shí)驗(yàn)，因?yàn)樗鼤?huì)導(dǎo)致自由基的形成。

2020-04-02 10:58:50如何用校正曲線法對(duì)鋼鐵中含量低于1%的C元素進(jìn)行定量分析？: 【問(wèn)題的提出】一方面，由于碳污染無(wú)處不在、很難控制以及分光晶體本身是由含 C 元素的材質(zhì)構(gòu)成等原因，準(zhǔn)確測(cè)量 C 是所有顯微分析中的一個(gè)難點(diǎn)，另一方面，鋼鐵和某些材料用戶，準(zhǔn)確測(cè)量碳鋼中的碳濃度又是一件必須的事情，為此，電子探針?lè)治鲋虚_(kāi)發(fā)出了校正曲線法，實(shí)現(xiàn)碳鋼中的 C 含量準(zhǔn)確定量分析。該分析方法基于————鋼中 C 含量低于 1%時(shí)，C 的 X 射線強(qiáng)度和濃度滿足線性關(guān)系。對(duì)于鋼中碳化物的 C 的定量分析仍需要 ZAF 分析方法來(lái)測(cè)量。【測(cè)量原理】低碳鋼中 C 含量的精確定量測(cè)定步驟 ? 選用 4 個(gè)（或 5 個(gè)）已經(jīng)碳含量（C）的低碳鋼作為標(biāo)準(zhǔn)樣品 ? 選擇 LDE2 晶體或 LDE2H 晶體分別對(duì)上述標(biāo)準(zhǔn)樣品進(jìn)行碳的 X 射線強(qiáng)度測(cè)量（I） ? 利用 JXA-8230 電子探針的 Calibration Curve Quantitative Method 標(biāo)準(zhǔn)軟件及上述測(cè)量數(shù)據(jù)，可以得到如下圖所示的 I—C 直線 ? 選擇上述 4 個(gè)標(biāo)準(zhǔn)樣品中的某一個(gè)樣品作為未知樣品，再次測(cè)量這個(gè)樣品的碳的 X射線強(qiáng)度 Ix，利用上述 I—C 曲線，就可以算出對(duì)應(yīng)于 Ix 的 Cx ? Cx 和已知的該標(biāo)準(zhǔn)樣品的碳濃度 C 一致下面操作步驟是山東大學(xué)材料學(xué)院劉樹(shù)帥老師整理的詳細(xì)步驟，供大家參考。在此，我們也對(duì)他的辛勤工作表示由衷的感謝！！！一、標(biāo)樣庫(kù)的建立1、標(biāo)樣的選擇：需要具備含碳量低于 1%的五個(gè)鋼鐵樣品標(biāo)樣；2、分光晶體的選擇：利用 LDE2H 或 LDE6H 探測(cè)含量較低的 C 元素；3、建立標(biāo)樣分析條件的設(shè)置：（1）建立 Fe-C 標(biāo)樣的標(biāo)樣庫(kù)（Std.Mng）；（2）建立標(biāo)樣的峰位及強(qiáng)度信息(STD)：首先，分析條件的選擇： #1：由于標(biāo)樣中 C 含量較低，且 C 元素特征 X-ray 的波長(zhǎng)較長(zhǎng)，為了保證足夠的計(jì)數(shù)強(qiáng)度，加速電壓推薦設(shè)置為 15KV，束流 500nA； #2：電子束與樣品交互作用時(shí)，由與碳沉積等因素會(huì)對(duì)標(biāo)樣中某一位置的含 C 量造成影響，因此，標(biāo)樣的采集選擇同步控制法（即保持 PCD 的常開(kāi)狀態(tài)），特別提醒：同步控制法中 PCD的常開(kāi)狀態(tài)僅在 Accumulation 狀態(tài)下生效，定量分析時(shí)不會(huì)起作用。同時(shí)，標(biāo)樣的采集不再進(jìn)行尋峰和扣背底，縮短電子束在標(biāo)樣上的駐留時(shí)間； #3：標(biāo)樣分析位置的采集以及束斑尺寸的選擇：由于標(biāo)樣中 C 元素的含量較低，可能存在碳含量分布不均的情況，因此，需要采用Accumulation 的方式錄入標(biāo)樣位置信息（通常采用陣列的方法錄入，如選擇合適的陣列數(shù)，根據(jù)標(biāo)樣選擇恰當(dāng)?shù)牟介L(zhǎng)），利用光鏡逐一核對(duì)標(biāo)樣位置；推薦束斑尺寸為 50μm； #4：譜儀和分光晶體的選擇，C 元素峰位的標(biāo)記：通常，根據(jù)機(jī)器配置，選擇 LDE2H 或 LDE6H 分光晶體，同時(shí)，在距離采集強(qiáng)度信息較遠(yuǎn)的位置處尋峰；另外，為了盡可能的弱化碳沉積，將 Peak 采集時(shí)間由默認(rèn) 10s 更改為 2s，Acquire 后獲得校正曲線； #5：打開(kāi)校正曲線的窗口，點(diǎn)擊 confirm，對(duì)采集數(shù)據(jù)中偏離較大的數(shù)值進(jìn)行合理的刪減，然后重新計(jì)算平均強(qiáng)度（挑肥揀瘦）；通過(guò)以上系列操作，建立起校正曲線的標(biāo)樣信息。二、未知樣品的定量分析： #1：加速電壓 15KV，束流 500nA； #2：修正方法：選擇 Calibration Curve 法，并設(shè)置尋峰和背底均為 none； #3：束斑尺寸：50μm，分析位置可根據(jù)需求進(jìn)行設(shè)置； #4：分光晶體選擇 LDE2H 或 LDE6H，peak 駐留時(shí)間 2s，選擇建立的校準(zhǔn)曲線標(biāo)樣信息； #5：獲得微量 C 元素定量分析的結(jié)果；Intensity & Wt. % Group : Fe-C-STD-2 Sample : Fe-C-STD-2_0002_QNT Page 1 Unknown Specimen No. 1 Path : Fe-C-Cr-Ni Project : Fe-C-STD-2_0002 Position No. : 1 Comment :Stage : X= -28.5292 Y= -1.3514 Z= 10.7345 Acc. Voltage : 15.0 (kV) Probe Dia. : 50.0 Scan : Off Dated on 2019/08/20 17:42:49 WDS only No. of accumulation : 1 Element Peak(mm) Curr.(A) Counts Time(s) S.D. 1 C 124.846 4.999E-007 23219.8 2.0 152.3Calibration curve Metal Acc. Voltage : 15.0 (kV) Element Mass(%) Atom(%) cps/uA S.D.(%) C 0.6921 100.0000 23224.4 0.0045 ---------------------------------------------------------------------------------------Total 0.6921 100.0000 23224.4Unknown Specimen No. 2 Path : Fe-C-Cr-Ni Project : Fe-C-STD-2_0002 Position No. : 2 Comment : Stage : X= -28.4311 Y= -1.7044 Z= 10.7450 Acc. Voltage : 15.0 (kV) Probe Dia. : 50.0 Scan : Off Dated on 2019/08/20 17:43:01 WDS only No. of accumulation : 1 Element Peak(mm) Curr.(A) Counts Time(s) S.D. 1 C 124.846 4.996E-007 22449.8 2.0 149.83Calibration curve Metal Acc. Voltage : 15.0 (kV) Element Mass(%) Atom(%) cps/uA S.D.(%) C 0.6332 100.0000 22467.8 0.0042 ---------------------------------------------------------------------------------------------Total 0.6332 100.0000 22467.8Unknown Specimen No. 3 Path : Fe-C-Cr-Ni Project : Fe-C-STD-2_0002 Position No. : 3 Comment : Stage : X= -28.7638 Y= -1.7638 Z= 10.7525 Acc. Voltage : 15.0 (kV) Probe Dia. : 50.0 Scan : Off Dated on 2019/08/20 17:43:13 WDS only No. of accumulation : 1 Element Peak(mm) Curr.(A) Counts Time(s) S.D. 1 C 124.846 4.997E-007 21204.4 2.0 145.62Calibration curve Metal Acc. Voltage : 15.0 (kV) Element Mass(%) Atom(%) cps/uA S.D.(%) C 0.5358 100.0000 21217.2 0.0037 ----------------------------------------------------------------------------------------------Total 0.5358 100.0000 21217.2

2019-08-22 14:40:20離子色譜儀對(duì)污廢水中多聚磷酸鹽的測(cè)定: 對(duì)多聚磷酸鹽的分析如P2O74-,P3O105-,一般是先將其轉(zhuǎn)化為PO43-用光度法測(cè)定總磷,此法不僅要作樣品前處理,而且不能進(jìn)行形態(tài)分離。用離子色譜法,陰離子交換分離;氧化鈉淋洗液和甲醇有機(jī)改進(jìn)劑,梯度淋洗分離多聚磷酸鹽(正磷酸鹽PO43-、焦磷酸鹽P2O74-、三聚磷酸鹽P3O105-),化學(xué)YZ電導(dǎo)檢測(cè)的Z低檢出限達(dá)到15~50微克/升。下圖B為同時(shí)分離5種磷酸鹽的標(biāo)準(zhǔn)色譜圖。另外，使用疏水性非常低的陰離子分離柱分離多聚磷酸鹽有了新的進(jìn)展。一次進(jìn)樣可同時(shí)測(cè)定正、焦、三聚和四聚磷酸鹽。

2018-11-25 06:45:12表面處理:黑色磷酸鹽是不是發(fā)黑:

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