2025 版中國藥典 2341 聚焦：中藥材農藥殘留 “隱形雷區”，液質分析方案大揭秘

2025-02-08 18:30:12 43閱讀次數

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中華文化，源遠流長。中藥材作為傳統中醫理論重要組成部分，在診療中發揮著巨大的作用，因而中藥材相關的質量檢驗至關重要。最新版中國藥典標準 2341 中對中藥材中 42 種農藥殘留的前處理和分析方案做了詳細的要求，具體要求和實驗室重現方案如下：

第一法（2）

前處理：

快速樣品處理法（QuEChERS）法

取供試品粉末（過三號篩）3g，精密稱定，置 50mL 具塞離心管中，加入 1% 冰醋酸溶液 15mL，渦旋使藥粉充分浸潤，放置 30 分鐘，精密加入乙腈 15mL，渦旋使混勻，置振蕩器上劇烈振蕩（每分鐘 500 次）5 分鐘，加入無水硫酸鎂與無水乙酸鈉的混合粉末（4:1）7.5g，立即搖散，再置振蕩器上劇烈振蕩（每分鐘 500 次）3 分鐘，置冰浴中冷卻 10 分鐘，離心（每分鐘 4000 轉）5 分鐘，作為提取溶液。精密取提取溶液 9mL，置預先裝有凈化材料的分散固相萃取凈化管（無水硫酸鎂 900mg，N-丙基乙二胺 300mg，十八烷基硅烷鍵合硅膠 300mg，硅膠 300mg，石墨化碳黑 90mg）中，渦旋使充分混勻，置振蕩器上劇烈振蕩（每分鐘 500 次）5 分鐘使凈化完全，離心（每分鐘 4000 轉）5 分鐘，取上清液，即得。

固相萃取法

固相萃取凈化方式包括以下三種：

方式一：精密量取直接提取法制備的供試品溶液或 QuEChERS 法提取溶液 3~5 mL，置于裝有分散型凈化材料的凈化管 [無水硫酸鎂 1200 mg，N-丙基乙二胺 300 mg，十八烷基硅烷鍵合硅膠 100 mg] 中，渦旋使充分混勻，再置震蕩器上劇烈震蕩（每分鐘 500 次）5 分鐘使凈化完全，離心，取上清液，即得。

方式二：精密量取直接提取法制備的供試品溶液或 QuEChERS 法提取溶液 3~5 mL，通過親水親油平衡材料（HLB SPE）固相萃取柱（200 mg，6 mL）凈化，收集全部凈化液，混勻，即得。

方式三：精密量取直接提取法制備的供試品溶液或 QuEChERS 法提取溶液 2 mL，加在裝有石墨化碳黑氨基復合固相萃取小柱（500 mg，6 mL）（500 mg/500 mg，6 mL）[臨用前用乙腈-甲苯混合溶液（3:1）10 mL 預洗]，用乙腈-甲苯混合溶液（3:1）20 mL 洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮至近干，用乙腈轉移并稀釋至 2.0 mL，混勻，即得。

分析：

高效液相色譜-串聯質譜法

色譜條件 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑（柱長為 100 mm，內徑為 2.1 mm，粒徑為 1.8 μm）；以 0.1% 甲酸溶液（含 5 mmol/L 甲酸銨）為流動相 A，以甲醇 - 0.1% 甲酸溶液（含 5 mmol/L 甲酸銨）（95:5）為流動相 B，按下表 2 進行梯度洗脫；流速為每分鐘 0.3 mL，柱溫為 40℃。

表2流動相梯度

時間（分鐘）	流動相 A（%）	流動相 B（%）
0~1	70	30
1~12	70→0	30→100
12~14	0	100

*內容取自最新版中國藥典2341標準草案公示稿

依據中國藥典 2341 標準要求細節，實驗室選取薄荷葉、天麻、丹參樣品進行分析，部分結果如下：

QuECHERS 法前處理步驟

稱量：稱取薄荷葉樣品 3.0 g（精確至 0.001 g）置于 50 mL 帶螺旋蓋的離心管中，加標；

提取：加入 1% 冰醋酸溶液15 mL，渦旋使藥粉充分浸潤，放置 30 分鐘，精密加入乙腈 15 mL，渦旋使混勻，劇烈手搖 5 分鐘，加入 4 顆玻璃均質子，后加入 Cleanert MAS-Q 提取鹽包立即搖散，劇烈手搖 3 分鐘，置冰浴中冷卻 10 分鐘， 4000 r/min 離心 5 分鐘，上清液作為提取液；

凈化：精密吸取提取液 9 mL，置于 Cleanert MAS-Q 凈化包中，渦旋使充分混勻，劇烈手搖 5 分鐘使凈化完全，8000 r/min 離心 5 分鐘，取上清液過 0.22 μm 尼龍（NY）濾膜于棕色進樣小瓶中，待測定。

QuECHERS 法前處理-色譜條件

色譜柱：Luna Omega Polar C18 1.6 μm，2.1 × 100 mm；P/No：00D-4748-AN

流動相：

A：0.1% 甲酸-5 mM 甲酸銨水溶液；

B：甲醇：0.1% 甲酸-5 mM 甲酸銨水溶液=95:5；

流速：0.2 mL/min；

柱溫：40 ℃；

進樣量：3 μL；

梯度程序見下表：

時間（min）	流速（mL/min）	A（%）	B（%）
0	0.2	95	5
1.00	0.2	95	5
3.00	0.2	50	50
6.00	0.2	10	90
8.00	0.2	0	100
10.00	0.2	0	100
10.50	0.2	95	5
15.00	0.2	95	5

QuECHERS 法部分回收結果

薄荷葉基質加標部分回收實驗結果

固相萃取第三法前處理步驟

稱量：稱取天麻樣品 3.0 g（精確至 0.001 g）置于 50 mL 帶螺旋蓋的離心管中，加標；

提取：加入 1% 冰醋酸溶液 15mL，渦旋使藥粉充分浸潤，放置 30 分鐘，精密加入乙腈 15 mL，渦旋使混勻，劇烈手搖 5 分鐘，加入 4 顆玻璃均質子，后加入 Cleanert MAS-Q 提取鹽包立即搖散，劇烈手搖 3 分鐘，置冰浴中冷卻 10 分鐘，4000 r/min 離心 5 分鐘，上清液作為提取液；

活化：Cleanert PestiCarb/NH₂ 小柱用 10mL 洗脫液活化；

上樣：精密吸取提取液 2 mL 小柱上樣，接流出；

洗脫：20 mL 洗脫液洗脫小柱，抽干小柱；

濃縮：40℃ 氮氣吹至 0.5 mL~1 mL，每次加入 5 mL 乙腈進行溶劑置換，置換兩次后，氮氣吹至 0.1 mL。用乙腈定容至 2.0 mL ，過 0.22 μm 尼龍（NY）濾膜于棕色進樣小瓶中，待測定。

固相萃取第三法前處理-色譜條件同 QuECHERS 法。

固相萃取第三法前處理部分回收結果

天麻基質加標部分回收實驗結果

小知識：

在固相萃取第三法前處理中，實驗人員發現最后上機液中如果加 0.3 mL 水上機結果會整體偏高，并且對溶劑效應沒有特別大的改善，所以實驗選擇凈化后過濾膜直接上機。

氮吹對農藥回收率影響較大。所以選擇基質標同氮吹來消除氮吹的干擾。同樣在氮吹過程中不能吹干，由于洗脫液中含有甲苯對質譜不友好，選擇通過溶劑置換的方法來解決洗脫液中甲苯的問題。

更重要的是，實驗中甲磺隆、氯磺隆、胺苯磺隆等三種磺隆類農藥回收率較差，推測《中國藥典2341 農藥殘留量測定法藥典標準草案公示稿》中第二法高效液相色譜法-串聯質譜法固相萃取法方式三不適合做磺隆類農藥，因此磺隆類藥物建議用固相萃取法前兩種方式。想了解固相萃取其他前處理詳細步驟或更多 tips 細節分享，咨詢官網&公眾號參考完整報告。

42 種農殘液質解決方案如下：

前處理法	前處理產品&貨號	色譜柱
QuECHERS	Cleanert MAS-Q 提取鹽包：50 mL 50/pk （MS-MG5052-1） Cleanert MAS-Q 凈化包：50/pk （MS-9PP0268）	Luna Omega Polar C18 1.6 μm，2.1 × 100 mm；（00D-4748-AN）
固相萃取第一法	Cleanert MAS-Q 提取鹽包：50mL 50/pk （MS-MG5052-1） Cleanert MAS-Q 凈化包：50/pk （MS-9PA1233）	同上
固相萃取第二法	Cleanert MAS-Q 提取鹽包：50mL 50/pk （MS-MG5052-1） Cleanert PEP：200mg/6mL 30/pk （PE2006）	同上
固相萃取第三法	Cleanert MAS-Q 提取鹽包：50mL 50/pk （MS-MG5052-1） Cleanert PestiCarb/NH₂：500mg/500mg/6mL （PN0006）	同上

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