- 2025-01-21 09:29:54蛋白質氧化
- 蛋白質氧化是指蛋白質分子中的氨基酸殘基在氧化應激條件下被氧化修飾的過程。這種氧化可以是由自由基、活性氧等引起的，導致蛋白質結構、功能和代謝的改變。蛋白質氧化會破壞蛋白質的正常生理功能，影響其酶活性、結構穩定性和與其他分子的相互作用，從而對細胞、組織和生物體產生負面影響，與多種疾病的發生和發展密切相關。
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蛋白質氧化問答
- 2022-10-24 11:44:23面霜的氧化穩定性分析-油脂氧化分析儀
- 化妝品或個人護理產品的保質期是制造商確定產品最適合使用的時期，化妝品的保質期通常與它們的抗氧化性有關。面臨的挑戰是如何防止氧化，防止氧化產生的產品具有更長的保質期。化妝品質量的最重要的因素之一，吸收氧氣導致的產品變化，導致老化、功能特性喪失，在某些情況下會變黃。因此，許多化妝品的質保期與氧化密切相關，氧化是由氧氣、光、高溫、微量金屬，在某些情況下，還有酶促進的。OXITEST可以測定各種樣品類型的氧化穩定性，測試整個樣品，不需要預處理。油脂氧化分析儀檢測原理根據最常見的應用，OXITEST加速氧化過程的原因是兩個加速因素:溫度和氧氣壓力。該儀器測量兩個腔內的絕對壓力變化，監測樣品中反應組分的吸氧情況，并自動生成IP值。IP定義:IP代表誘導期，它是到達氧化起始點所需的時間，對應于可檢測到的酸腐程度或氧化速率的突然變化。誘導期越長，抗氧化能力越強。檢測儀器：OXITEST油脂氧化分析儀（意大利VELP）參考標準：國際標準方法AOCS Cd 12c-16檢測樣品：3種面霜含有不同含量的維生素E作為抗氧化劑，面霜的脂肪含量為10.5% Face cream formula A/Face cream formula B/Face cream formula C實驗結果：每個樣本都被監測了兩次。在氧化測試結束時，每次運行的IP由OXISoftTM軟件計算。這是得到的每一個配方的面霜氧化曲線。重復性試驗使用OXISoftTM，可以為每個分析創建一個重復性測試，以獲得結果的平均、標準偏差和相對標準偏差。對于重復性測試，需要在相同的溫度和壓力下，對相同數量的樣品進行重復分析。下表總結了結果。配方比較使用OXISoftTM，還可以很容易地比較不同配方在相同條件下測試得到的IP值，并識別出最穩定的一個。結論：從OXISoftTM得到的結果和配方比較功能中，可以明顯區分抗氧化面霜:面霜C的IP最短，其次是樣品B和樣品A。因此，作為抗氧化劑的維生素E含量較佳的面霜是配方A，氧化穩定性較高。
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- 2023-05-22 13:22:32奇亞籽粉的氧化穩定性分析-OXITEST油脂氧化分析儀
- 許多研究已經證明,飽和脂肪和反式脂肪酸的攝入量增加心血管疾病的發病率密切相關,而脂質豐富的ω3脂肪酸的消費減少的風險這一病理。奇亞籽(Chia seeds flour鼠尾草)種子是富有的自然來源α亞麻酸(C18:3)營養代表ω3的重要來源。奇異籽是一種起源于中美洲的糧食作物，在前哥倫布文明的飲食中占有重要地位，使用奇異籽作為一種新型食品配料已得到歐洲議會和歐洲理事會的批準。游離或酯化的不飽和脂肪酸對氧氣的吸收是食品質量重要的改變之一。脂肪的自動氧化是一種由氧、光、高溫、金屬痕跡，有時還有酶促進的化學反應。OXITEST可以測定各種樣品類型的氧化穩定性，不需要對脂肪進行初步分離。根據常見的應用，由于溫度和氧氣壓力這兩個加速因素，OXITEST加快了氧化過程。該儀器測量兩個腔室內的壓力變化，監測樣品中反應組分的吸氧情況，并自動生成一個IP值。（IP表示誘導期，是到達氧化起始點所需的時間，對應于可檢測的酸敗程度或氧化速率的突然變化。誘導期越長，抗氧化能力越強。）樣品：Chia seeds flour Fat labeled value: 30 %儀器：油脂氧化分析儀（意大利VELP）檢測結果：奇亞籽面粉樣品在80、90、100℃下進行了測試。在氧化測試結束時，通過軟件OXISoftTM自動計算每次運行的IP值。估計保質期下圖顯示了IP和溫度之間的關系。使用在不同溫度下獲得的IP結果，在結果之間的線性方程的情況下，有可能預測產品在儲存溫度(例如25℃)下的貨架期，這很容易由專門的推斷OXISoftTM程序“預估保質期"。結論：不同溫度下ln(IP)結果的相關性為線性(R2)= 0, 999932)。通過OXISoftTM結果估算了奇亞籽面粉在25℃貯藏溫度下的抗氧化能力。富氧可以在相當短的時間內估計奇亞籽面粉的保質期，得到同樣的結果。測試是由直接在整個樣本；不需要初步油脂分離；耐鈦室；節省時間的分析,如果相比傳統方法；專為研發開發，產品開發和質量控制實驗室。通過軟件OXISoft?可獲得的許多信息:1、重復性試驗:在同一樣品或標準上進行的一系列試驗，以驗證其IP周期，計算數據的準確性和重復性2、新鮮度檢驗:檢驗不同批次產品的質量，例如同一種原料，并進行比較3、包裝比較:用于測試哪種包裝能使產品保持在Z鮮的狀態4、配方比較:在相同條件下，確定成品Z穩定的配方5、老化期間的IP:得到產品在貨架期間IP下降的曲線圖6、預估貨架期:對貨架期的氧化穩定性進行預測
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- 2023-06-05 11:53:22油脂氧化分析儀的日常保養
- 油脂氧化分析儀OXITEST采用的技術和特殊的操作軟件，操作員可同時監測和記錄兩個氧化室的氧化過程，計算誘導期。操作員可以打印包含操作條件和計算誘導期結果的報告，誘導期可以通過兩種不同的方法計算。 維護工作是延長儀器的使用壽命和保持Z佳工作狀態的基本要求，因此按照要先的描述進行維護保養工作是很重要的。日常保養包括下面的操作：1. 在每個測試開始前；2. 確認 O 型密封圈具有良好的密封性；3. 檢查過濾器上面未沾染脂肪以防對下一個實驗產生影響；4. 檢查氧化室已經清洗干凈；5. 檢查樣品盤、樣品盤蓋等已經清洗干凈，為沾染不同樣品；6. 進行空白和泄露測試：用空的干凈的氧化室進行空白測試，選定行設置測試類型為“Blank"；7. 更換 O 型密封圈（50 次分析后）；8. 清洗 filters（20 次分析后）。
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- 2025-04-14 18:30:13反相液相色譜蛋白質原理是什么？
- 反相液相色譜（Reverse Phase Liquid Chromatography, RPLC）是一種基于疏水相互作用的高效分離技術，廣泛應用于蛋白質及多肽的分離、純化與分析。其核心原理在于固定相與流動相的極性差異，以及樣品分子與固定相之間的疏水分配效應。以下將從分離機制、蛋白質特異性行為、固定相與流動相選擇、應用場景等角度展開說明。 反相色譜的固定相通常由疏水性材料（如C18、C8或C4鍵合硅膠）構成，而流動相為極性溶劑（如水、甲醇或乙腈）。分離過程中，蛋白質的疏水區域與固定相發生非共價結合，極性較強的分子優先被流動相洗脫，疏水性更強的分子則因保留時間延長而實現分離。梯度洗脫是優化分離效果的關鍵手段，通過逐步增加有機溶劑比例削弱疏水作用，從而按疏水性差異依次洗脫目標分子。 蛋白質在反相色譜中的行為具有特殊性。由于流動相中常添加三氟乙酸（TFA）等離子對試劑，蛋白質可能發生部分去折疊，暴露出內部疏水殘基，增強與固定相的相互作用。此外，低濃度TFA可誘導蛋白質形成伸展構象，導致其在死時間前洗脫；而高濃度TFA通過形成離子對使蛋白質構象緊湊（如“熔融球體”），延長保留時間。這種構象敏感性使反相色譜不僅能分離蛋白質，還可用于研究其構象穩定性與表面疏水性。 固定相的選擇需綜合考慮蛋白質大小與疏水性。C18和C8適用于小分子肽段，而C4因較短的烷基鏈更適合大分子蛋白質，避免過度保留。流動相中，乙腈因低黏度和高洗脫能力成為首選有機溶劑，TFA則通過抑制硅醇基電離減少峰拖尾。梯度優化需平衡分辨率與時間成本，例如降低最大有機溶劑濃度可改善峰分離，但可能延長分析周期。 在應用層面，反相色譜憑借高分辨率與質譜兼容性，成為蛋白質組學研究的重要工具。其典型場景包括：多肽藥物的純度分析、酶解產物的肽圖繪制、翻譯后修飾（如磷酸化、糖基化）的檢測，以及蛋白質構象變化的動態監測。例如，與質譜聯用時，反相色譜可分離復雜肽段混合物，通過質譜鑒定實現蛋白質序列的高通量解析。此外，其在治療性抗體表征中的應用也日益增多，尤其在檢測聚集體與降解產物方面表現卓越。 操作參數的設置直接影響分離效能。流速需根據色譜柱內徑與填料粒徑調整，通常內徑4.6mm的C18柱推薦流速為1mL/min。壓力上限需控制在柱耐受范圍內（通常≤6000psi），以避免固定相塌陷。檢測方法方面，紫外檢測（280nm）依賴蛋白質中芳香族氨基酸的吸收，而質譜聯用可提供分子量及結構信息，靈敏度更高。 總之，反相液相色譜通過疏水相互作用與動態梯度洗脫，實現了蛋白質的高效分離與分析。其獨特的構象敏感性、靈活的固定相選擇及與質譜的兼容性，使其在生物醫藥與基礎研究中不可或缺。未來，隨著新型固定相（如表面多孔顆粒）與微流控技術的發展，反相色譜在蛋白質分析中的分辨率與通量將進一步提升。
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- 2025-01-15 12:15:14蛋白質純化系統連接方法有哪些？
- 蛋白質純化是生物科學研究和藥物開發中的關鍵步驟，而蛋白質純化系統的連接方法對于保證純化過程的效率與穩定性至關重要。本文將詳細探討蛋白質純化系統的連接方法，包括不同設備的選擇、連接方式以及優化方案，幫助研究人員在實驗過程中提高工作效率，確保實驗結果的可靠性和 reproducibility。通過深入了解每種連接方法的特點與適用場景，您將能夠根據具體的實驗需求，選擇合適的方案，大限度地提高蛋白質純化的質量和產量。 1. 蛋白質純化系統的構成與連接需求 蛋白質純化過程通常需要多個系統和設備的配合，包括但不限于色譜柱、流動相系統、樣品注射系統和檢測儀器。為了確保每一環節的高效運行，各個系統的連接方式必須得到精確設計。合理的連接方法不僅能提高系統的穩定性，還能降低操作中的誤差，提高純化效率。 通常，蛋白質純化系統的連接方法涉及流體通路的設計，包括管道、泵、閥門和分配器的連接。每個系統之間的連接方式應確保流體流動的順暢性和穩定性，并能夠應對不同壓力和流量要求。需要特別注意的是，連接點的密封性、管道的內徑與材質、以及操作過程中的溫度控制，這些都會直接影響純化過程的質量。 2. 常見的蛋白質純化系統連接方式 (1) 軟管與接頭連接 軟管與接頭的連接是常見的一種連接方式，尤其適用于低壓力系統。軟管的柔性設計使得它能夠在有限的空間內靈活布置，并能適應不同規格的連接接頭。對于流動相較為復雜或者需要快速更換系統的實驗，這種連接方式具有很大的便利性。 使用軟管時，接頭的密封性和材質的選擇至關重要。通常，建議選用不含金屬雜質的高質量材料，避免在蛋白質純化過程中引入不必要的污染物。根據實際需求，可以選擇硅膠、聚氨酯或氟塑料等不同材質的軟管。 (2) 硬管與快速連接系統 對于高壓、需要精確控制流量的實驗，硬管與快速連接系統的組合則顯得更加重要。這種連接方式通常應用于需要較高流量和壓力控制的色譜系統。硬管材質通常為不銹鋼或高耐壓塑料，能夠在高壓條件下保持穩定性。 快速連接系統則通過快捷的卡扣設計，可以快速拆卸、組裝，減少設備更換時間。在自動化實驗和大規模蛋白質純化系統中，這種連接方式的高效性尤為突出。 (3) 聯鎖閥門與自動化系統的結合 自動化蛋白質純化系統中，聯鎖閥門和智能控制系統的結合使用可以實現更的實驗操作。這些系統通過電子傳感器監控流體的狀態，并根據反饋自動調節流量、壓力等參數。閥門之間的聯鎖設計則避免了人為操作錯誤，確保了實驗過程的穩定性。 3. 連接方法的優化建議 在選擇合適的連接方式時，研究人員應根據實驗的具體要求，綜合考慮以下幾個因素： 流量與壓力要求：系統是否需要大流量和高壓處理，這將直接影響管道和連接件的選擇。 清潔與消毒要求：高純度蛋白質的提純過程要求系統設備必須能夠高效清洗，連接點應易于拆卸清洗，防止交叉污染。 操作與維護的便利性：在多次使用的實驗環境中，連接系統的拆卸與維護便利性至關重要，過于復雜的連接會增加操作難度。 自動化程度與智能控制：根據實驗規模，選用適合的自動化系統，能夠提高實驗效率，減少人為操作帶來的誤差。 4. 結語 蛋白質純化系統的連接方法是影響純化效果和實驗效率的關鍵因素。合理的連接方案不僅能優化流體通路，提升純化效果，還能確保系統的長期穩定運行。通過合理選擇軟管與接頭、硬管與快速連接系統，或是聯鎖閥門與自動化系統的組合，能夠使整個實驗過程更加高效與精確。專業的連接方案在蛋白質純化的各個環節中發揮著至關重要的作用，保障研究工作的成功開展。
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