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2025-01-10 10:49:44多維度生物活性因子: 多維度生物活性因子是指在生物學(xué)領(lǐng)域內(nèi)，具有多種生物活性的物質(zhì)或分子。這些因子能夠影響細(xì)胞增殖、分化、凋亡等生命過(guò)程，從而在多個(gè)維度上調(diào)節(jié)生物體的生理和病理狀態(tài)。它們廣泛存在于生物體內(nèi)，包括蛋白質(zhì)、多肽、小分子化合物等，對(duì)于維持生物體穩(wěn)態(tài)、促進(jìn)組織修復(fù)、調(diào)節(jié)免疫功能等方面具有重要作用。

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我們已知 TNFα（腫瘤壞死因子 α）是一種涉及到系統(tǒng)性炎癥的細(xì)胞因子，同時(shí)也是屬于引起急相反應(yīng)的眾多細(xì)胞因子中的一員。

美谷分子儀器（上海）有限公司 250
2023-07-22
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多維度生物活性因子問(wèn)答

2023-06-28 09:33:13小鼠色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA試劑盒操作概要: 　　小鼠色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA試劑盒操作概要　　僅供體外研究使用，不用于臨床診斷!　　本試劑盒運(yùn)用雙抗體夾心ELISA法定量測(cè)定小鼠血清、血漿、組織勻漿、細(xì)胞裂解液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液和其他生物液體中小鼠色素上皮衍生因子(PEDF)含量。　　檢測(cè)范圍　　0.781-50ng/mL　　檢測(cè)限　　0.35ng/mL　　實(shí)驗(yàn)原理　　將小鼠色素上皮衍生因子(PEDF)抗體包被于96孔微孔板中，制成固相載體，向微孔中分別加入標(biāo)準(zhǔn)品或標(biāo)本，其中的小鼠色素上皮衍生因子(PEDF)與連接于固相載體上的抗體結(jié)合，然后加入生物素化的小鼠色素上皮衍生因子(PEDF)抗體，將未結(jié)合的生物素化抗體洗凈后，加入HRP標(biāo)記的親和素，再次洗滌后加入TMB底物顯色。TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的小鼠色素上皮衍生因子(PEDF)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(O.D.值)，計(jì)算樣品濃度。　　試劑盒內(nèi)容　　試劑名稱數(shù)量試劑名稱數(shù)量　　96孔板(預(yù)包被)196孔板覆膜2　　標(biāo)準(zhǔn)品0.5ml×1標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶　　顯色劑A液6ml×1瓶樣品稀釋液6ml×1瓶　　顯色劑B液6ml×1瓶終止液6ml×1瓶　　酶標(biāo)試劑6ml×1瓶密封袋1　　濃洗滌液(30×)1×20mL使用說(shuō)明書(shū)1　　小鼠色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA試劑盒需自備的設(shè)備及試劑　　1. 450±10nm濾光片的酶標(biāo)儀(建議儀器使用前提前預(yù)熱)　　2. 單道或多道微量加液器及吸頭　　3. 稀釋樣品的EP管　　4. 蒸餾水或去離子水　　5. 吸水紙　　6. 盛放洗液的容器　　試劑盒的儲(chǔ)存及有效期　　1. 未開(kāi)封的試劑盒：所有試劑均按試劑瓶標(biāo)簽上所示保存。請(qǐng)注意，收到試劑盒后請(qǐng)盡快將TMB 洗滌液，終止液保存于4℃，其他試劑保存于-20℃。　　2. 使用后的試劑盒：剩余試劑仍需按照試劑瓶標(biāo)簽所示的溫度保存，開(kāi)封后的酶標(biāo)板要加干燥劑后密封保存于-20℃，避免潮濕。　　注意：　　試劑盒內(nèi)酶標(biāo)條可拆卸，按實(shí)驗(yàn)需求可分多次使用;使用后的剩余試劑盒建議在實(shí)驗(yàn)后 1個(gè)月內(nèi)使用完畢。產(chǎn)品過(guò)期時(shí)間以盒子上的標(biāo)簽為準(zhǔn)，保質(zhì)期內(nèi)所有組分都確保是穩(wěn)定的。　　小鼠色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA試劑盒標(biāo)本的采集與保存　　1. 血清：　　將收集于血清分離管的全血標(biāo)本在室溫放置 2 小時(shí)或 4oC 過(guò)夜，然后 1000×g 離心 20 分鐘，取上清即可，或?qū)⑸锨逯糜?20oC 或-80oC 保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。　　2. 血漿：　　用 EDTA 或肝素作為抗凝劑采集標(biāo)本，并將標(biāo)本在采集后的 30 分鐘內(nèi)于 2-8oC 1000×g 離心 15 分鐘，取上清即可檢測(cè)，或?qū)⑸锨逯糜?20oC或-80oC 保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。　　3. 組織勻漿：　　1) 取適量組織塊，于預(yù)冷PBS(0.01mol/L, pH 7.0-7.2)中清洗去除血液，稱重后備用(組織塊較大需先剪碎后再勻漿);　　2) 可同時(shí)選用多種勻漿方法達(dá)到較好的破碎效果：首先將組織塊移入玻璃勻漿器，加入5-10mL 預(yù)冷PBS 進(jìn)行充分研磨，該過(guò)程需在冰上進(jìn)行(有條件實(shí)驗(yàn)室可選用機(jī)器勻漿);得到的勻漿液可再利用超聲破碎或反復(fù)凍融進(jìn)一步處理(超聲破碎過(guò)程中注意冰浴降溫;反復(fù)凍融法可重復(fù)2次)。　　3) 將制備好的勻漿液于5000×g 離心5 分鐘，留取上清即可檢測(cè)。　　4. 細(xì)胞裂解液：　　1)貼壁細(xì)胞需要先用胰酶消化，離心收集細(xì)胞(懸浮細(xì)胞可直接離心收集);　　2)將收集到的細(xì)胞用冷PBS 洗3 次;　　3)物理方法裂解細(xì)胞(可先超聲破碎細(xì)胞，再反復(fù)凍融)：　　i 超聲破碎：取適量PBS 重懸細(xì)胞，用一定功率的超聲波處理細(xì)胞懸液，使細(xì)胞急劇震蕩破裂。　　ii 反復(fù)凍融：將待破碎的細(xì)胞在-20 oC 以下冰凍，室溫融解，反復(fù)3 次，使細(xì)胞溶脹破碎。　　4)將標(biāo)本于2-8 oC 1500×g 離心10 分鐘，收集上清備用。　　5. 細(xì)胞培養(yǎng)上清或其它生物標(biāo)本：　　請(qǐng) 1000×g 離心 20 分鐘，取上清即可檢測(cè)，或?qū)⑸锨逯糜?20oC 或-80oC 保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。　　注意：　　1. 以上標(biāo)本均需密封保存，4oC保存應(yīng)小于1周，-20oC不應(yīng)超過(guò)1個(gè)月，-80oC不應(yīng)超過(guò)2個(gè)月。　　2. 標(biāo)本使用前應(yīng)緩慢均衡至室溫，不應(yīng)加熱使之融解。　　3. 實(shí)驗(yàn)前紅細(xì)胞裂解液必須用標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液稀釋。　　小鼠色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA試劑盒試劑準(zhǔn)備　　1. 使用前將所有的試劑和標(biāo)本緩慢均衡至室溫(18-25oC)，試劑不能直接在37oC溶解。　　2. 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品)：每瓶標(biāo)準(zhǔn)品加入標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1mL，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解，其濃度為50ng/mL。準(zhǔn)備7個(gè)稀釋標(biāo)準(zhǔn)品的EP管，每個(gè)EP管中加入150μL的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液，如圖所示依次倍比稀釋成不同的梯度，標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液(0pg/mL)直接作為空白孔。為實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。　　3. 濃洗滌液：用580mL蒸餾水或去離子水將20mL濃洗滌液稀釋至600mL，進(jìn)行30倍稀釋。　　標(biāo)本處理　　1. 本公司只對(duì)試劑盒本身負(fù)責(zé)，不對(duì)因使用該試劑盒所造成的樣本消耗負(fù)責(zé)，請(qǐng)使用者使用前充分考慮到樣本的可能使用量，預(yù)留充足的樣本。　　2. 實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)標(biāo)本含量，如果標(biāo)本濃度過(guò)高，應(yīng)對(duì)標(biāo)本進(jìn)行稀釋?zhuān)瓜♂尯蟮臉?biāo)本符合試劑盒的檢測(cè)范圍，計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。　　3. 若所檢樣本不包含在說(shuō)明書(shū)所列樣本之中，建議進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證其有效性，并注意留存樣本。　　4. 使用化學(xué)裂解液制備的組織勻漿或細(xì)胞提取液可能會(huì)由于某些化學(xué)物質(zhì)的引入導(dǎo)致 ELISA實(shí)驗(yàn)結(jié)果偏差。　　5. 若樣本為細(xì)胞培養(yǎng)上清，因該類(lèi)樣本干擾因素較多，如：細(xì)胞狀態(tài)、細(xì)胞數(shù)量、采樣時(shí)間等，所以可能存在檢測(cè)不出的情況。　　6. 某些天然蛋白或重組蛋白，包括原核及真核重組蛋白，可能因?yàn)榕c本產(chǎn)品所使用的檢測(cè)抗體及捕獲抗體不匹配，而不被檢測(cè)出。　　7. 建議使用新鮮樣本，保存時(shí)間過(guò)長(zhǎng)可能會(huì)存在蛋白降解或變性導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果偏差。　　小鼠色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA試劑盒操作步驟　　1. 加樣：分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。　　2. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。　　3. 配液：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用　　4. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。　　5. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。　　6. 溫育：操作同3。　　7. 洗滌：操作同5。　　8. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.　　9. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。　　10. 測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。　　注意：　　1. 試劑準(zhǔn)備：準(zhǔn)備一次實(shí)驗(yàn)所需要的酶標(biāo)條，其它的可從微孔板上拆下，密封，按照說(shuō)明書(shū)要求保存，以備下次使用。　　2. 加樣：實(shí)驗(yàn)操作中請(qǐng)使用一次性的吸頭，避免交叉污染。加樣時(shí)注意不要有氣泡，將樣品加于酶標(biāo)板底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。加樣或加試劑時(shí)，個(gè)孔與一個(gè)孔加樣之間的時(shí)間間隔如果太大，將會(huì)導(dǎo)致不同的“預(yù)溫育”時(shí)間，從而明顯地影響到測(cè)量值的準(zhǔn)確性及重復(fù)性。因此，一次加樣時(shí)間(包括標(biāo)準(zhǔn)品及所有樣品)控制在10分鐘內(nèi)。推薦設(shè)置復(fù)孔進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。　　3. 溫育：為防止樣品蒸發(fā)，實(shí)驗(yàn)時(shí)請(qǐng)將加上蓋或覆膜的酶標(biāo)板置于濕盒內(nèi)，以避免液體蒸發(fā)，洗板后應(yīng)盡快進(jìn)行下步操作，任何時(shí)侯都應(yīng)避免酶標(biāo)板處于干燥狀態(tài)，同時(shí)應(yīng)嚴(yán)格遵守給定的溫育時(shí)間和溫度。　　4. 洗滌：充分的洗滌非常重要，在每次洗滌過(guò)程中，都要將洗滌液甩干。洗滌過(guò)程中反應(yīng)孔中殘留的洗滌液應(yīng)在濾紙上拍干，勿將濾紙直接放入反應(yīng)孔中吸水，同時(shí)要消除板底殘留的液體和手指印，避免影響的酶標(biāo)儀讀數(shù)。如果有自動(dòng)洗板機(jī)，應(yīng)在熟練使用后再用到正式實(shí) 驗(yàn)過(guò)程中。　　5. 反應(yīng)時(shí)間的控制：加入底物后請(qǐng)定時(shí)觀察反應(yīng)孔的顏色變化(比如，每隔10分鐘觀察一次)，如顏色較深，請(qǐng)?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)，避免反應(yīng)過(guò)強(qiáng)從而影響酶標(biāo)儀光密度讀數(shù)。　　6. 底物：底物請(qǐng)避光保存，在儲(chǔ)存和溫育時(shí)避免強(qiáng)光直接照射。　　7. 如果實(shí)驗(yàn)室內(nèi)濕度低于60%，推薦使用加濕器提高濕度水平。　　實(shí)驗(yàn)流程　　1. 實(shí)驗(yàn)前標(biāo)準(zhǔn)品、試劑及樣本的準(zhǔn)備;　　2. 加樣(標(biāo)準(zhǔn)品及樣本)50μL，37℃孵育30分鐘;　　3. 洗板5次，加酶標(biāo)試劑50ul，37℃孵育半小時(shí);　　4. 洗板5次;加入顯色液A，B各50ul,37℃孵育顯色15分鐘　　5. 加終止液50μL，立即450nm讀數(shù)。　　6. 計(jì)算　　小鼠色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA試劑盒計(jì)算　　各標(biāo)準(zhǔn)品及樣本O.D.值扣除空白孔O.D.值后作圖(七點(diǎn)圖)，如設(shè)置復(fù)孔，則應(yīng)取其平均值計(jì)算。以標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為縱坐標(biāo)(或?qū)?shù)坐標(biāo))，O.D.值為橫坐標(biāo)(或?qū)?shù)坐標(biāo))，繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線(方程式應(yīng)依回歸方程計(jì)算的R2值來(lái)定，以R2值越趨近于1為好)。推薦使用專(zhuān)業(yè)制作曲線軟件進(jìn)行分析，如curve expert 1.30，根據(jù)樣品O.D.值，由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度，乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與O.D.值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程式，將樣品的O.D.值代入方程式，計(jì)算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實(shí)際濃度。　　特異性　　本試劑盒用于檢測(cè)小鼠色素上皮衍生因子(PEDF)，經(jīng)檢測(cè)與其它相似物質(zhì)無(wú)明顯交叉反應(yīng)。　　由于受到技術(shù)及樣本來(lái)源的限制，不可能完成對(duì)所有相關(guān)或相似物質(zhì)交叉反應(yīng)檢測(cè)，因此本試劑盒有可能與未經(jīng)檢測(cè)的其它物質(zhì)有交叉反應(yīng)。　　精密度　　精密度用樣品測(cè)定值的變異系數(shù)CV表示。CV(%) = SD/mean×100　　批內(nèi)差：取同批次試劑盒對(duì)低、中、高值定值樣本進(jìn)行定量檢測(cè),每份樣本連續(xù)測(cè)定20 次，分別計(jì)算不同濃度樣本的平均值及SD值。　　批間差：選取3個(gè)不同批次的試劑盒分別對(duì)低、中、高值定值樣本進(jìn)行定量測(cè)定，每個(gè)樣本使用同一試劑盒重復(fù)測(cè)定8次，分別計(jì)算不同濃度樣本的平均值及SD值。　　批內(nèi)差： CV

2025-01-21 12:15:12霉菌培養(yǎng)箱用處多嗎？: 霉菌培養(yǎng)箱用處霉菌培養(yǎng)箱是一種用于控制濕度、溫度、光照等環(huán)境因素的專(zhuān)用設(shè)備，廣泛應(yīng)用于微生物學(xué)研究、藥物開(kāi)發(fā)、環(huán)境監(jiān)測(cè)以及食品安全等多個(gè)領(lǐng)域。它的主要功能是為霉菌的生長(zhǎng)提供理想的環(huán)境，以便進(jìn)行精確的實(shí)驗(yàn)觀察和數(shù)據(jù)分析。隨著科技進(jìn)步，霉菌培養(yǎng)箱的使用范圍不斷擴(kuò)展，不僅限于實(shí)驗(yàn)室，還在生產(chǎn)過(guò)程中扮演著重要角色。本文將深入探討霉菌培養(yǎng)箱的多種用處，幫助讀者更好地了解其應(yīng)用價(jià)值。 1. 微生物學(xué)研究中的應(yīng)用霉菌培養(yǎng)箱廣泛的應(yīng)用之一是在微生物學(xué)研究中。許多微生物的生長(zhǎng)、繁殖與霉菌密切相關(guān)，研究人員通常通過(guò)控制培養(yǎng)環(huán)境來(lái)分析霉菌的生長(zhǎng)特性。例如，在藥物開(kāi)發(fā)中，霉菌培養(yǎng)箱能夠模擬不同的溫濕度條件，研究人員利用這些條件觀察霉菌的反應(yīng)，為新藥的研發(fā)提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。通過(guò)控制實(shí)驗(yàn)環(huán)境，霉菌培養(yǎng)箱能夠幫助科研人員深入理解霉菌的代謝過(guò)程，從而為微生物學(xué)的進(jìn)展作出貢獻(xiàn)。 2. 食品行業(yè)中的應(yīng)用霉菌培養(yǎng)箱在食品行業(yè)的應(yīng)用也非常廣泛，尤其是在食品安全和質(zhì)量控制方面。在食品加工過(guò)程中，霉菌的存在可能導(dǎo)致食品變質(zhì)，甚至對(duì)人類(lèi)健康造成威脅。霉菌培養(yǎng)箱能夠提供模擬的環(huán)境，用于檢測(cè)和評(píng)估食品中可能存在的霉菌種類(lèi)。通過(guò)定期對(duì)食品樣品進(jìn)行培養(yǎng)分析，食品生產(chǎn)商可以在早期發(fā)現(xiàn)霉菌污染，并采取有效措施加以防范，確保食品的安全性與品質(zhì)。 3. 藥品開(kāi)發(fā)與質(zhì)量控制在制藥行業(yè)，霉菌培養(yǎng)箱也發(fā)揮著重要作用。某些藥物的生產(chǎn)過(guò)程可能涉及霉菌的培養(yǎng)和篩選，以確保藥物的有效性和穩(wěn)定性。通過(guò)精確控制培養(yǎng)箱內(nèi)的環(huán)境參數(shù)，藥品制造商可以對(duì)霉菌的生長(zhǎng)過(guò)程進(jìn)行有效監(jiān)控，并確保所培養(yǎng)的霉菌種類(lèi)符合要求。霉菌培養(yǎng)箱還可用于藥品的穩(wěn)定性測(cè)試，模擬不同的環(huán)境變化對(duì)藥品質(zhì)量的影響，從而為藥品質(zhì)量控制提供數(shù)據(jù)支持。 4. 環(huán)境監(jiān)測(cè)與污染控制隨著環(huán)境污染問(wèn)題的加劇，霉菌培養(yǎng)箱在環(huán)境監(jiān)測(cè)中的作用日益重要。霉菌在自然環(huán)境中廣泛分布，對(duì)空氣、水源及土壤等環(huán)境質(zhì)量產(chǎn)生重要影響。利用霉菌培養(yǎng)箱，研究人員可以模擬污染環(huán)境，評(píng)估霉菌在不同污染物條件下的生長(zhǎng)情況。例如，空氣中的霉菌濃度較高時(shí)，可能會(huì)導(dǎo)致健康問(wèn)題，培養(yǎng)箱可以幫助研究人員深入分析污染源與霉菌生長(zhǎng)之間的關(guān)系，從而為環(huán)境治理和公共健康管理提供科學(xué)依據(jù)。 5. 教育培訓(xùn)中的作用霉菌培養(yǎng)箱在教育培訓(xùn)領(lǐng)域也有著重要的作用。在微生物學(xué)課程或?qū)嶒?yàn)課上，學(xué)生通過(guò)霉菌培養(yǎng)箱進(jìn)行實(shí)際操作，能夠掌握霉菌的生長(zhǎng)原理及其培養(yǎng)方法。教師可以利用培養(yǎng)箱控制環(huán)境因素，讓學(xué)生通過(guò)觀察霉菌的生長(zhǎng)情況，進(jìn)一步理解微生物的基本知識(shí)。實(shí)驗(yàn)教學(xué)不僅幫助學(xué)生加深對(duì)理論的理解，還為他們提供了實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)，促進(jìn)了教學(xué)與科研的結(jié)合。 6. 工業(yè)生產(chǎn)中的應(yīng)用霉菌培養(yǎng)箱還廣泛應(yīng)用于工業(yè)生產(chǎn)中，尤其是在發(fā)酵生產(chǎn)過(guò)程中。許多工業(yè)產(chǎn)品，如釀酒、醬油、醋等，都需要特定種類(lèi)的霉菌進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)。在此過(guò)程中，霉菌培養(yǎng)箱提供了一個(gè)精確控制的環(huán)境，保證霉菌能夠在佳條件下生長(zhǎng)繁殖，從而提高產(chǎn)品的質(zhì)量和產(chǎn)量。結(jié)語(yǔ) 霉菌培養(yǎng)箱作為一種專(zhuān)業(yè)設(shè)備，在多個(gè)領(lǐng)域中具有不可替代的重要作用。通過(guò)精確控制環(huán)境因素，霉菌培養(yǎng)箱能夠?yàn)槲⑸飳W(xué)研究、食品安全、藥品開(kāi)發(fā)、環(huán)境監(jiān)測(cè)等方面提供穩(wěn)定、可重復(fù)的實(shí)驗(yàn)條件。隨著技術(shù)的不斷發(fā)展，霉菌培養(yǎng)箱的應(yīng)用前景也將更加廣闊，它將在更多領(lǐng)域發(fā)揮出重要作用，推動(dòng)科學(xué)研究和產(chǎn)業(yè)發(fā)展邁向新的高度。

2023-06-01 17:29:38DSC測(cè)試覆銅板PCB玻璃化轉(zhuǎn)變溫度Tg和固化因子ΔTg: 本文介紹了用差示掃描量熱儀(DSC)測(cè)試覆銅板PCB玻璃化轉(zhuǎn)變溫度和固化因子ΔTg。印刷電路板（PCB, Printed Circuit Board）是重要的電子部件，是電子元器件的支撐體。PCB的樹(shù)脂成分發(fā)生玻璃化轉(zhuǎn)變時(shí)，PCB的整體力學(xué)性能和介電性能大幅減弱，故此PCB需要足夠高的Tg。DSC是測(cè)試Tg最為普遍的一種熱分析手段，在發(fā)生玻璃化轉(zhuǎn)變的過(guò)程中，樣品的比熱會(huì)出現(xiàn)特征性變化，即在DSC曲線上表現(xiàn)出臺(tái)階式的轉(zhuǎn)變。玻璃化轉(zhuǎn)變溫度Tg就是高分子聚合物最重要的特征性能之一，是FR-4基材等級(jí)最常見(jiàn)的劃分方式之一，也是IIPC-4101 《剛性及多層印制板基材規(guī)范》中最重要的性能指標(biāo)之一。通常認(rèn)為，玻璃化轉(zhuǎn)變溫度越高，層壓板的可靠性越高。PCB使用DSC玻璃化轉(zhuǎn)變溫度測(cè)試標(biāo)準(zhǔn)可參考IPC-TM-650 2.4.25。除了玻璃化轉(zhuǎn)變溫度以外，固化度也會(huì)影響材料的使用溫度、強(qiáng)度、膨脹系數(shù)、失效情況等性質(zhì)。由于增強(qiáng)材料和其他填料的存在，PCB無(wú)法像聚合物基體材料一樣通過(guò)測(cè)量殘余固化熱來(lái)判斷固化程度。大量的研究和實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)表明，Tg強(qiáng)烈依賴于固化程度。因此可以將材料再次經(jīng)歷固化條件，對(duì)比再次固化前后的Tg變化，得出固化程度的結(jié)論。IPC-TM-650 2.4.25，將再次固化前后的Tg分別定義為T(mén)g1和Tg2，將兩次Tg之差（Tg2-Tg1）定義為固化因子ΔTg。為了便于比較，標(biāo)準(zhǔn)還規(guī)定，以玻璃化轉(zhuǎn)變臺(tái)階的中點(diǎn)或拐點(diǎn)溫度作為T(mén)g。圖1為某覆銅板PCB的DSC玻璃化轉(zhuǎn)變溫度結(jié)果。第一次加熱的Tg1為133.3℃，第二次加熱的Tg2為136.2℃。由此可以獲得固化因子ΔTg為2.9℃。環(huán)氧體系的PCB，目前行業(yè)中標(biāo)準(zhǔn)認(rèn)為ΔTg大于5℃時(shí)，材料的固化程度不完全，需要提高固化程度；當(dāng)ΔTg小于5℃時(shí)，產(chǎn)品固化完全。但要注意，即使ΔTg

2022-06-13 09:09:42轉(zhuǎn)錄因子控制細(xì)胞表面蛋白“組合編碼”: 細(xì)胞核內(nèi)的轉(zhuǎn)錄因子是決定細(xì)胞命運(yùn)、形態(tài)、和生理功能的中心指揮者，而在細(xì)胞膜表面的蛋白則通過(guò)與細(xì)胞環(huán)境的相互作用來(lái)執(zhí)行這些指令。“轉(zhuǎn)錄因子→細(xì)胞表面蛋白→生理功能”的框架被認(rèn)為存在于一切涉及細(xì)胞與環(huán)境交流的生物學(xué)過(guò)程中。例如在發(fā)育的神經(jīng)元中，科學(xué)家們常常假設(shè)轉(zhuǎn)錄因子通過(guò)調(diào)節(jié)細(xì)胞表面蛋白的表達(dá)，來(lái)控制神經(jīng)元之間連接，形成特定的神經(jīng)環(huán)路。2022年5月24日，來(lái)自美國(guó)斯坦福大學(xué)與霍華德休斯醫(yī)學(xué)研究所的知名學(xué)者駱利群教授，帶領(lǐng)團(tuán)隊(duì)在Neuron期刊上發(fā)表研究論文，用一個(gè)定義譜系的轉(zhuǎn)錄因子Acj6為例子，展示了轉(zhuǎn)錄因子如何“四兩撥千斤”，通過(guò)調(diào)節(jié)不同組合的表面蛋白的表達(dá)，控制不同神經(jīng)元類(lèi)型的連接。駱利群實(shí)驗(yàn)室的博士生謝琦婧和李介夫博士為本文的共同***作者。早在2003年，駱利群教授團(tuán)隊(duì)發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)錄因子Acj6特異性表達(dá)在果蠅嗅覺(jué)系統(tǒng)投射神經(jīng)元（projection neuron，PN）的一個(gè)譜系（lineage）中，并控制這些神經(jīng)元特異性的樹(shù)突靶向。不過(guò)，當(dāng)時(shí)由于缺少直接測(cè)量特定細(xì)胞群體表面蛋白表達(dá)的方法，無(wú)法進(jìn)一步知道Acj6以及其他轉(zhuǎn)錄因子如何通過(guò)細(xì)胞表面的蛋白質(zhì)控制神經(jīng)連接的特異性。直到2020年，駱利群教授、本文的共同***作者李介夫博士與合作者發(fā)展了一種高時(shí)空分辨率的蛋白組學(xué)技術(shù)，在方法上實(shí)現(xiàn)了突破。這種技術(shù)使得研究人員可以直接在完整果蠅大腦內(nèi)對(duì)指定細(xì)胞類(lèi)型的表面蛋白組進(jìn)行高精度的生物素標(biāo)記、富集和分析，也為系統(tǒng)地研究轉(zhuǎn)錄因子如何在多細(xì)胞生物的完整組織中塑造細(xì)胞表面蛋白質(zhì)組提供了可能。▲相關(guān)閱讀：駱利群/Alice Ting聯(lián)合團(tuán)隊(duì)《細(xì)胞》發(fā)文，創(chuàng)新技術(shù)找到多個(gè)神經(jīng)連接調(diào)節(jié)因子在此次新研究中，研究人員運(yùn)用這種蛋白組學(xué)技術(shù)，首先找到了轉(zhuǎn)錄因子Acj6調(diào)節(jié)哪些細(xì)胞表面蛋白來(lái)執(zhí)行它的命令。他們分別在野生態(tài)和acj6功能喪失突變體中，對(duì)投射神經(jīng)元進(jìn)行了表面蛋白組的定量分析，然后基于蛋白組學(xué)的數(shù)據(jù)進(jìn)行體內(nèi)篩選，由此揭示了許多執(zhí)行Acj6連接指示的分子。這些表面蛋白有一些正如作者的猜測(cè)，屬于細(xì)胞粘附分子，但還有一些則令人意外。比如，機(jī)械敏感離子通道Piezo。這種蛋白傳統(tǒng)上被認(rèn)為只介導(dǎo)神經(jīng)元功能，但他們發(fā)現(xiàn)，失去機(jī)械敏感離子通道活性的Piezo突變體可以與野生型Piezo一樣精準(zhǔn)調(diào)控PN樹(shù)突靶向。“這個(gè)結(jié)果***展示了Piezo獨(dú)立于機(jī)械感覺(jué)離子通道的功能。”作者指出。 ▲在PN中敲除Piezo導(dǎo)致樹(shù)突錯(cuò)誤的靶向（白色箭頭）接下來(lái)，為了建立轉(zhuǎn)錄因子Acj6與其調(diào)控的表面蛋白在樹(shù)突靶向中的功能性聯(lián)系，研究人員在表達(dá)Acj6的投射神經(jīng)元中特異性地敲除了acj6，同時(shí)又在這些神經(jīng)元中特異性地表達(dá)了Acj6促進(jìn)表達(dá)的表面蛋白。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，在不同神經(jīng)元類(lèi)型中，Acj6通過(guò)調(diào)控不同組合的表面蛋白表達(dá)來(lái)指定這類(lèi)神經(jīng)元特異的靶向。“在不同神經(jīng)元中，一個(gè)轉(zhuǎn)錄因子是通過(guò)調(diào)節(jié)相同、還是不同的細(xì)胞表面蛋白以指定它們的特異連接，這個(gè)問(wèn)題過(guò)去并不清楚。”研究人員指出，“發(fā)育神經(jīng)生物學(xué)長(zhǎng)期存在一種假設(shè)，認(rèn)為神經(jīng)連接的特異性可能是由表面蛋白組合編碼（combinatorial code）控制，現(xiàn)在我們***為這一假設(shè)提供了實(shí)驗(yàn)證據(jù)，展示了表面蛋白間的遺傳相互作用模式（加法、減法和協(xié)同）。”▲Acj6在不同神經(jīng)元類(lèi)型中通過(guò)調(diào)控不同表面蛋白（cell-surface executor）的表達(dá)來(lái)控制神經(jīng)連接特異性正如科學(xué)家們?cè)谡撐闹刑峒暗哪菢樱@篇文章為未來(lái)研究轉(zhuǎn)錄因子功能與機(jī)理提出了一個(gè)新的策略和方法的原型。RNA提取磁珠屬于納米生物磁珠的一種，主要作用是用于核酸提取過(guò)程中的RNA提取，粒徑分布在500nm左右，是洛陽(yáng)吉恩特生物自主研發(fā)生產(chǎn)的高分子納米磁性微球，該磁珠懸浮時(shí)間長(zhǎng)，磁響應(yīng)時(shí)間迅速，對(duì)DNA甲基化過(guò)程中的提取環(huán)節(jié)提供良好的支持，可明顯縮短實(shí)驗(yàn)時(shí)間，提高實(shí)驗(yàn)效率，并在提取結(jié)果上保持穩(wěn)定，配合核酸提取儀，更能實(shí)現(xiàn)快速的RNA提取。

2023-06-16 14:30:12Spinsights離心洞察第四期-衡量離心效率的關(guān)鍵指標(biāo)—K因子: 需要擴(kuò)大樣品體積或升高轉(zhuǎn)速以提高效率時(shí)，離心參數(shù)轉(zhuǎn)換時(shí)有發(fā)生。繁瑣的計(jì)算復(fù)雜且耗時(shí)，貝克曼庫(kù)爾特為您提供方便實(shí)用的軟件工具及在線解決方案，實(shí)現(xiàn)離心參數(shù)無(wú)縫轉(zhuǎn)換。簡(jiǎn)化方案轉(zhuǎn)換RPM與RCF間的相互轉(zhuǎn)換根據(jù)來(lái)源不同，離心方案的描述單位可能是RPM（每分鐘轉(zhuǎn)數(shù)）或RCF（相對(duì)離心力）—— RCF又稱g-force（xg），一般用來(lái)表示最大半徑（rmax）處的離心力。RCF和RPM可通過(guò)轉(zhuǎn)頭半徑進(jìn)行換算，如需將方案轉(zhuǎn)換至新的離心管/瓶或轉(zhuǎn)頭，還需了解現(xiàn)有離心機(jī)及新離心機(jī)的更多信息。衡量離心效率的指標(biāo)—— k 因子從一個(gè)轉(zhuǎn)頭（離心管）轉(zhuǎn)換到另一個(gè)轉(zhuǎn)頭（離心管），rmin 和 rmax均會(huì)改變，而且最大相對(duì)離心力不能體現(xiàn)效率。因?yàn)镵因子綜合了沉降路徑與相對(duì)離心力，所以可以表示沉降效率。同時(shí)K因子也能用以計(jì)算運(yùn)行時(shí)間，在使用不同轉(zhuǎn)頭、離心管（瓶）、適配器及加樣體積的情況下，都能使方案轉(zhuǎn)換變得簡(jiǎn)單輕松。離心專(zhuān)家”替代轉(zhuǎn)頭運(yùn)行“小程序適當(dāng)轉(zhuǎn)換離心方案不僅需要匹配 RPM 或 RCF 值，追蹤轉(zhuǎn)頭及離心管尺寸規(guī)格也是一個(gè)繁瑣的過(guò)程。Optima XPN超速離心機(jī)配備eXpert離心專(zhuān)家軟件，其中的模擬功能可高效進(jìn)行方案轉(zhuǎn)換。此外，在線轉(zhuǎn)頭計(jì)算器同樣可以實(shí)現(xiàn)方案轉(zhuǎn)換。小貝學(xué)習(xí)中心”離心參數(shù)計(jì)算器“小結(jié)在新的離心機(jī)上使用現(xiàn)有離心方案，必然涉及繁瑣的手工計(jì)算。貝克曼庫(kù)爾特為您提供便捷、快速的轉(zhuǎn)換工具。