
- 2025-04-25 14:12:35電鏡原位原子力顯微鏡
- 電鏡原位原子力顯微鏡是一種高端分析儀器,結合了電子顯微鏡的高分辨率成像與原子力顯微鏡的納米級力學測量能力。它能在電鏡環境下直接對樣品進行原子尺度的形貌觀測與力學性質分析,如硬度、彈性模量等。該技術廣泛應用于材料科學、納米技術、生物醫學等領域,為科研人員提供了在復雜環境中研究物質微觀結構與性能的新手段,有助于揭示材料在納米尺度上的行為與機制。
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電鏡原位原子力顯微鏡問答
- 2022-12-06 13:04:21探秘腫瘤微環境,原位“看透”細胞因子
- 細胞因子是腫瘤微環境(Tumor Microenvironment,TME)中細胞通訊的關鍵介質,在癌癥的發生、發展、治 療和預后等多個方面發揮重要作用。在過去的 40 年中,細胞因子和細胞因子受體作為癌癥靶點或癌癥治 療方法得到了廣泛的研究。目前公認的臨床前治 療策略為增強干擾素和白細胞介素(包括 IL-2 ,IL-7 ,IL-12 和 IL-15 )的生長抑 制和免疫刺激作用,或抑 制細胞因子(如 TNF ,IL-1β 和 IL-6 )的炎癥和促進腫瘤的作用[1]。圖 1 . 細胞因子在腫瘤微環境中的作用特定細胞因子的表達也與腫瘤細胞的高存活率和高轉移性密切相關。其中促炎細胞因子 IL-6 和 IL-8 與多種癌癥相關,包括淋巴瘤、黑色素瘤、乳腺癌、前列腺癌和結腸直腸癌等 [2,3]。因此,分析細胞因子的表達是一種重要的診斷工具和預測癌癥預后的關鍵因素。非放射性的 RNA 原位雜交技術(ViewRNA ISH)是一種高靈敏度的檢測細胞因子表達的有效方法,并且可以對 1 至 4 個 mRNA 目標進行多重分析。檢測原理如下圖所示:圖 2 . ViewRNA ISH 檢測原理安捷倫BioTek Cytation 5 多功能細胞成像微孔板檢測系統,可容納多達四個熒光通道同時成像,快速并出色地成多色熒光成像。儀器配備的高內涵分析軟件可自動計算細胞內 RNA 的表達水平。Cytation 5 活細胞成像工作站結合ViewRNA ISH,為細胞因子研究提供了一種高效率、高靈敏度和可重復的檢測方法。實驗案例分享 實驗一.細胞因子mRNA的成像和分析 為研究細胞因子mRNA 在不同營養條件下的表達情況,設置兩組對照實驗。陽性對照細胞培養于完全培養基中,而陰性對照細胞經過 18 小時的血清饑餓處理。隨后加入 ViewRNA 探針以標記 IL-6 、IL-8 和 ACTB mRNA ,在Cytation 5 上分別使用 RFP 、GFP 、Cy5 和 DAPI 通道對探針進行成像完成 ISH 細胞分析。圖像結果表明:細胞因子mRNA 的表達在營養匱乏的條件下會顯著降低。圖 3 . 陽性和陰性對照組成像。HCT116 放大 20 倍圖像作為( A )陽性對照和( B )陰性對照。MDA-MB-231 細胞放大 40 倍的圖像作為( C )陽性對照和( D )陰性對照。藍色:DAPI 染色的細胞核;綠色:標記 IL-8 mRNA ;橙色:標記 IL-6 mRNA ;紅色:標記 ACTB mRNA 。接下來為了定量分析細胞因子表達,首先在 Cytation 5 的 DAPI 通道下進行細胞核計數,以確定每孔的細胞數量(圖 4A )。然后分別在GFP 、RFP 通道進行細胞因子探針( IL-6 或 IL-8 )的熒光信號分析(圖 4B )。通過細胞熒光信號的比率評估不同實驗條件下的細胞因子表達(圖 5 )。圖 4 . 每個細胞的熒光信號分析。( A ) 使用 Agilent-BioTek Gen5 軟件進行細胞分析圈選出 DAPI 標記的細胞核;( B ) 熒光標記的 IL-8 信號的圖像分析。如圖 5 所示,使用 ViewRNA ISH 和 Cytation 5 這一組合準確的量化了細胞內 IL-6 和 IL-8 mRNA 的表達。圖 5 . MDA-MB-231 細胞中 IL-8 表達和 HCT116 細胞中 IL-6 表達,并以細胞數目進行校正。 實驗二.誘導細胞因子 mRNA 的表達 使用不同劑量的 IL-1β 刺激 DU145 細胞,以分析細胞因子的 mRNA 的表達(圖6)。圖 7 結果顯示:雖然 IL-6 和 IL-8 的 mRNA 表達增加,但 IL-8 的表達變化更為顯著,這與先前研究結果一致[4]。IL-1β 的最 高劑量下,這兩種細胞因子的表達減少則是由于細胞毒性。這驗證了該檢測方法的可行性與穩定性。圖 6 . 不同濃度的 IL-1β 刺激下的 IL-6 、IL-8 和 ACTB 熒光 mRNA 探針信號 ( A ) 0 ng/mL;( B ) 0.02 ng/mL ;0.128 ng/mL;( D ) 0.8 ng/mL。藍色:DAPI染色的細胞核;綠色:標記的IL-8 mRNA;橙色:標記的 IL-6 mRNA ;紅色:標記的 ACTB mRNA 。圖 7 . 不同濃度的 IL-1β 刺激下 DU145 細胞中 IL-6 和 IL-8 mRNA 的表達。 實驗三.抑 制細胞因子 mRNA 的表達 研究表明絲裂原活化蛋白激酶( MAPK )可調節 IL-8 ,并證明用 MAPK/ERK 抑 制劑 U 0126 治 療可減少 DU145 和 MDA-MB-231 細胞中的炎癥細胞因子[4,5]。為了確認這一現象并驗證 ViewRNA ISH 和 Cytation 5 這一組合的能力,將不同濃度的 U 0126 加入到每種細胞類型中孵育 30 分鐘。然后用 1 ng/mL 的 IL-1β 刺激 DU145 細胞達 3 小時,而 MDA-MB-231 細胞未被刺激。使用 GFP 和 RFP 通道進行細胞計數和圖像分析以評估在 U 0126 治 療后 IL-8 和 IL-6 細胞因子 mRNA 的表達。采集的圖像(圖 8 )和計算的熒光信號強度 (圖 9 )證實了 U 0126 的抑 制作用。此外,也驗證了該方法的靈敏度,可以準確識別給予抑 制劑后 mRNA 的表達變化。圖 8. U 0126 抑 制 IL-8 mRNA 的表達。圖像顯示了在不同濃度的 U 0126 處理后 ( A-E ) MDA-MB-231 細胞內 IL-6 、IL-8 和 ACTB 熒光 mRNA 探針信號;( F-J ) 為 DU145 細胞。藍色:DAPI 染色的細胞核;綠色:標記的 IL-8 mRNA ;橙色:標記的 IL-6 mRNA ;紅色:標記的 ACTB mRNA 。圖 9 . U 0126 治療后 IL-8 和 IL-6 mRNA 在 MDA-MB-231 和 DU 145 細胞中的表達結 語ThermoFisher 的 ViewRNA ISH 細胞分析試劑盒和探針提供一種靈敏的方法來檢測 mRNA 表達。該方法在安捷倫BioTek Cytation 5 細胞成像系統的加持下得以更更快地采集多熒光通道的圖像,并更精 準的計算出每一個細胞的熒光信號強度。這種檢測、成像和分析的完 美結合提供了一種靈敏、靈活和高通量的方法用以檢測細胞因子 mRNA 的表達。參考文獻:[1] Propper DJ, Balkwill FR. Harnessing cytokines and chemokines for cancer therapy. Nat Rev Clin Oncol. 2022 Apr;19(4):237-253.[2] Kampan NC, Xiang SD, McNally OM, Stephens AN, Quinn MA, Plebanski M. Immunotherapeutic Interleukin-6 or Interleukin-6 Receptor Blockade in Cancer: Challenges and Opportunities. Curr Med Chem. 2018;25(36):4785-4806.[3] Vecchi L, Mota STS, Zóia MAP, Martins IC, de Souza JB, Santos TG, Beserra AO, de Andrade VP, Goulart LR, Araújo TG. Interleukin-6 Signaling in Triple Negative Breast Cancer Cells Elicits the Annexin A1/Formyl Peptide Receptor 1 Axis and Affects the Tumor Microenvironment. Cells. 2022 May 20;11(10):1705.[4] Kooijman R, Himpe E, Potikanond S, Coppens A. Regulation of interleukin-8 expression in human prostate cancer cells by insulin-like growth factor-I and inflammatory cytokines. Growth Horm IGF Res. 2007 Oct;17(5):383-91.[5] Chelouche-Lev D, Miller CP, Tellez C, Ruiz M, Bar-Eli M, Price JE. Different signalling pathways regulate VEGF and IL-8 expression in breast cancer: implications for therapy. Eur J Cancer. 2004 Nov;40(16):2509-18.
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- 2022-07-19 13:22:26爾迪儀器-詳細介紹原子力顯微鏡
- 原子力顯微鏡是一種可用來研究包括絕緣體在內的固體材料表面結構的分析儀器。它通過檢測待測樣品表面和一個微型力敏感元件之間的極微弱的原子間相互作用力來研究物質的表面結構及性質。將一對微弱力極端敏感的微懸臂一端固定,另一端的微小針尖接近樣品,這時它將與其相互作用,作用力將使得微懸臂發生形變或運動狀態發生變化。掃描樣品時,利用傳感器檢測這些變化,就可獲得作用力分布信息,從而以納米級分辨率獲得表面形貌結構信息及表面粗糙度信息。三種基本操作模式:接觸式(contact)非接觸式(non-contact)輕敲式(tapping)AFM應用方面主要包括:1. 生物細胞的表面形態觀測;2. 生物大分子的結構及其他性質的觀測研究;3. 生物分子之間力譜曲線的觀測。原子力顯微鏡系統主要由三個部分組成:力檢測部分、位置檢測部分、反饋系統布魯克致力于讓科學家能夠取得突破性發現,并開發新的應用以提高人類生活質量。布魯克的高性能科學儀器和高價值的分析和診斷解決方案使科學家能夠探索分子、細胞和微觀層面的生命和材料。憑借與客戶的密切合作,布魯克在生命科學分子研究、應用和制藥應用以及顯微鏡、納米分析和工業應用等領域實現了創新突破和生產力提升,并創造了諸多客戶成功案例。近年來,布魯克也成為細胞生物學、臨床前成像、臨床影像學和蛋白質組學研究、臨床微生物學和分子病理學研究的高性能系統的提供者。bruker原子力顯微鏡在上海爾迪儀器科技有限公司有售,有需要可聯系我司。想要了解更多關于bruker原子力顯微鏡的資料,可以聯系上海爾迪儀器科技有限公司。
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- 2023-04-12 16:50:58焦耳加熱裝置-焦耳熱加熱器-合肥原位科技
- 合肥原位科技焦耳加熱裝置,針對導電材料,科學家可利用其自身的焦耳效應,對其施加電氣環境;針對非導電材料,則可通過我司配備的各類耐高溫極速加熱樣品臺進行加熱,從而使材料在極短的時間內(0~10 S)達到極高的溫度(1000~3000 ℃),升溫速率最快可達到10000k/s。通過對材料的極速升溫,可考察材料在極端環境、劇烈熱震情況下的物性改變。該產品目前廣泛應用在電池、催化、陶瓷、金屬材料等領域,可通過極速升降溫制備納米尺度顆粒,單原子催化劑,高熵合金等。裝置可定制電氣環境及真空系統。配件包含:控制柜、真空腔、電極、真空泵、高溫樣品臺、測溫探頭、適配線纜。合肥原位科技有限公司已構建原位表征系統解決方案(含測試)、催化劑評價裝置及焦耳加熱裝置三大主營產品體系,可滿足眾多用戶對于多環境原位表征的需求,同時為客戶提供原位測試工作。目前已與國內270余家知名高校、科研單位建立了各類聯絡機制。聯系我們,請登錄“合肥原位科技有限公司”,歡迎咨詢。
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- 2023-04-17 15:26:25常溫電鏡公開課第8講丨高壓冷凍組織樣品的電鏡制樣技術
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- 2023-06-08 16:04:39邀請函|飛納電鏡邀您共赴西北五省第十三屆電鏡學術交流及技術研討會!
- 會議邀請 “西北五省第十三屆電鏡學術交流及技術研討會”將于 2023 年 6 月 9 日 - 12 日在甘肅省蘭州市蘭州大學舉辦。此次會議是西北五省規模最 大、影響力最 強的電子顯微學盛會。本次會議將采用會前培訓、會議中專家報告、學術座談、廠商報告和廠家現場設備使用技術培訓形式。專家學者將齊聚一堂,共赴這場電鏡盛會。會議時間:2023 年 6 月 9 日 - 12 日會議地點:蘭州大學電鏡中心復納科技致力于為實驗室樣品制備與檢測提供智能、高效、可靠的高科技解決方案。其中飛納臺式掃描電鏡作為全 球 領 先的桌面式掃描電鏡,憑借操作簡單、成像質量高和效率高等優勢成為眾多研究人員的選擇。在本次會議中,我們也將現場展示飛納電鏡能譜一體機 ProX,由工程師現場開展電鏡技能培訓與問題答疑,歡迎大家前來上機測試。會議報告/ FUNA本次會議中,復納科技產品經理萬正宇將帶來“DENSsolutions 基于 MEMS 的原位透射電鏡技術發展 & STEM 在飛納臺式電鏡上的應用”主題報告,為大家分享最 新的原位實驗方案與 STEM 表征。歡迎各位專家老師和我們一起探討交流!01Pharos - STEM作為全 球 唯 一臺式場發射 Pharos-STEM 電子顯微鏡,在較低的加速電壓下,可減少電子束對樣品的損傷,顯著提高了圖像的襯度。Pharos STEM 電子顯微鏡,利用 FEG 高亮度電子源,可在透射模式下對薄樣品進行成像。專用的樣品夾可輕松裝載常規 3mm 直徑透射電鏡 (TEM) 載網,實現樣品的快速、安全切換。STEM 樣品杯可提供明場 (BF) 、暗場 (DF) 和高角度環形暗場 (HAADF) 像,并支持自定義選擇成像模式。02DENSsolutionsDENS 產品可以為原位 TEM 樣品施加外界刺激,捕捉 TEM 樣品在真實環境下的動態現象。目前提供的四種原位實驗方案:Wildfire TEM 原位加熱方案、Lightning TEM 原位熱電方案、Climate TEM 原位氣相加熱方案和 Stream TEM 原位液相加熱 / 加電方案,已經可以在 TEM 中引入氣、液、熱、電等多種狀態。03Technoorg Linda復納科技擁有 Technoorg Linda 離子研磨儀,采用離子束技術,可對樣品進行快速研磨及表面精細加工和最 終拋光。是 SEM / TEM 樣品表面處理的有力工具。04NEOSCANNeoscan 臺式顯微 CT 采用先進 X 射線成像技術,分辨率高,對場地要求少,緊湊便攜,適用于實驗室和研究機構日常使用。歡迎各位老師蒞臨展位與我們探討交流,我們隨時為您提供專業的解答與支持,現場也有精美小禮品相送噢!
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