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【概述】真菌毒素是由真菌在適宜環境條件下產生的一系列有毒次生代謝產物,膳食是人體攝入真菌毒素的主要方式。
食品中檢出率較高的真菌毒素主要由曲霉菌屬(Aspergillus)、青霉菌屬(Penicillium)以及鐮刀菌屬(Fusarium)等菌屬產生,包括黃曲霉毒素(Aflatoxin)、赭曲霉毒素A(Ochratoxin A)、雜色曲霉素(Sterigmatocystin)、展青霉素(Patulin)、伏馬菌素(Fumonisin)、玉米赤霉烯酮(Zearalenone)、嘔吐毒素(Deoxynivalenol)、雪腐鐮刀菌烯醇(NIV)、T-2毒素等。
【實驗/設備條件】
儀器設備:UPLC-MS/MS
Thermo Scientific TSQ Endura
色譜柱:Commasil? BEH T-C18
2.1 mm×100 mm,3 μm
流動相: A:5mM乙酸銨(0.1%甲酸)溶液 B:乙腈(0.1%甲酸)溶液
流動相梯度:初始90%A,40%A(0 min~2 min),10%A(2 min~6 min),
10%A(6min~7min),90%A(7min~8min),90%A(8min~10min)
流速:0.3 mL/min
柱溫:室溫
進樣體積:5.0 mL
【質譜條件】
鞘氣壓力:30 arb 輔氣壓力:8 arb
離子傳輸管:300 ℃ 輔氣溫度:350 ℃
檢測方式:多離子反應檢測(MRM)
掃描方式:正離子模式(ESI+)和負離子模式(ESI- )
【樣品提取】
稱取 5 g試樣于50 mL離心管中,加入20 mL乙腈-水-乙酸溶液(80:19:1),渦旋混勻,置于超聲波/渦旋振蕩器或搖床中振蕩20 min,在6000 r/min下離心10 min,取上清液備用。
【實驗/操作方法】
1)向玻璃試管中加入10 mL樣品提取液。
2)將凈化柱橡膠頭從試管頂端插入試管中,并向下壓凈化柱至試管底端。
3)將凈化柱上部凈化后的樣品提取液取出至樣品瓶或EP管中。
4)取5 mL凈化提取液,40℃條件下氮氣吹至近干,加入乙腈-水(50:50)溶液定容至1 mL,渦旋 30s 溶解殘渣,過微孔濾膜,上機分析。
【實驗結果/結論】
從表2中可知,使用Copure? 302多功能凈化柱處理后,得到10種多毒素(黃曲霉毒素B1、B2、G1、G2,玉米赤霉烯酮,嘔吐毒素,T-2毒素,赭曲霉毒素,伏馬毒素B1、B2)的回收率均在90-110%之間,RSD小于10 %,整體回收率評價優于國內A品牌。
從圖1可知,使用Copure? 302多功能凈化柱凈化處理樣品提取液后,上機液中的雜質干擾減少,目標物信號響應值提高,整體凈化效果評價優于國內A品牌,能夠滿足實驗使用需求。
【儀器/耗材清單】
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