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關鍵詞:
新型冠狀病毒;核酸提取;逆轉錄PCR;內標
引言:
新型冠狀病毒(severeacuterespiratorysyndromecoronavirus2,SARS-CoV-2)引起的新型冠狀病毒肺炎(coronavirusdisease,COVID-19)繼續在全世界肆虐。WHO報道,截至2020年6月1日11:11am,全世界確診病例6040609例,死亡病例230104例。對SARS-CoV-2進行核酸檢測,是WHO目前推薦的識別感染病例的方法。李克強總理主持召開中yang應對新冠肺炎疫情工作領導小組會議提出:提高新冠病毒核酸檢測能力,加快快速便捷檢測試劑和設備研發生產,縮短檢測時間,推進重dian人群“應檢盡檢”、其他人群“愿檢盡檢”,推動各地互通互認檢測結果,促進精zhun防控、人員流動和全面復工復產。
深圳市寶安中醫院(集團)檢驗科PCR實驗室自2020年3月10日開始SARS-CoV-2的核酸檢測工作,截至2020年5月11日,共檢測19522份標本。采用中山大學達安生物有限公司生產的“新型冠狀病毒核酸檢測試劑盒(熒光PCR法)”,試劑盒采用的內標(IC)為人類RNaseP基因(RP)。在實驗工作中,經常出現內標擴增曲線不出現典型“S”型或者內標完全無擴增曲線的情況,導致重復檢測,拖延了報告發放時間,給臨床診療工作帶來不便。本實驗室在經過一系列實驗之后,對達安公司試劑盒說明書中給出的實驗方法進行了部分更改優化,經優化實驗步驟后,內標的擴增曲線及起始循環Ct值均有明顯改善,現具體報道如下。
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