本文由 上海美析儀器有限公司 整理匯編

2024-09-16 12:28 595閱讀次數(shù)

掃    碼    分   享

收藏 評價 舉報

• 分享

立即下載

參與評論

評論

登錄后參與評論

登錄

獲取驗(yàn)證碼

我已經(jīng)閱讀并接受《儀器網(wǎng)服務(wù)協(xié)議》

立即登錄

更多資料

• 兩種不同釋放劑核酸提取法的新型冠狀病毒RT-PCR內(nèi)標(biāo)檢測結(jié)果比較

  兩種不同釋放劑核酸提取法的新型冠狀病毒RT-PCR內(nèi)標(biāo)檢測結(jié)果比較[詳細(xì)]

  2024-09-16 12:28

  應(yīng)用文章

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 真空質(zhì)量提取法檢漏儀

  目前很多廠家針對藥業(yè)的后期藥典要求得做：藥包材無損衰減法要替代真空水浴法的，因?yàn)闊o損檢測不會污染內(nèi)容物，它能夠檢測的孔徑也相對水浴法要高10倍以上，[詳細(xì)]

  2023-06-30 10:34

  應(yīng)用文章

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 電位滴定法比較不同pH電極測量結(jié)果差異

  電位滴定法比較不同pH電極測量結(jié)果差異[詳細(xì)]

  2014-08-14 00:00

  標(biāo)準(zhǔn)

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 《丹納赫生命科學(xué)新型冠狀病毒解決方案》精華版

  隨著新型冠狀病毒肺炎疫情的爆發(fā)，社會各界亟需精 準(zhǔn)醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的科技力量為疫情的FZ提供有力的支持。對傳 染性疾病的YL工作者來說，如何借助ZX的檢測技術(shù)實(shí)現(xiàn) 快速、安全、準(zhǔn)確地完成檢測任務(wù)；如何利用藥物試驗(yàn)和新 型臨床研究的Z近進(jìn)展，JZ輔助患者的用藥和進(jìn)一步的 跟蹤與ZL，如何提升實(shí)驗(yàn)室整體的生物安全性和可靠 性，是擺在人們面前的挑戰(zhàn)。 丹納赫生命科學(xué)平臺擁有新型冠狀病毒檢測、分析與研究 的工作流和前沿解決方案（有些已納入新型冠狀肺炎的診 療標(biāo)準(zhǔn)）,在疫情期間可用于病毒檢測與篩查，提供安全、快 速、JZ的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)和結(jié)果：通過一系列已驗(yàn)證的技術(shù)創(chuàng) 新，全面提升實(shí)驗(yàn)室的生物安全性；通過高通量自動化系 統(tǒng)的有機(jī)整合，顯著提高樣本檢驗(yàn)通量；借助ZX的臨床 前沿技術(shù)，提升檢驗(yàn)的靈敏度和可靠性；利用先進(jìn)的創(chuàng)新技 術(shù)，JZ輔助病人的JZ用藥。這些方案在國家疾控ZX、 各省市疾控ZX和在以武漢協(xié)和醫(yī)院檢驗(yàn)科為代表的眾 多YL機(jī)構(gòu)中都得到了廣泛的應(yīng)用。[詳細(xì)]

  2024-09-21 23:43

  應(yīng)用文章

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 氮吹儀兩種加熱方式的比較

  氮吹儀兩種加熱方式的比較[詳細(xì)]

  2009-05-11 00:00

  實(shí)驗(yàn)操作

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 新型凝膠劑研究進(jìn)展

  通過對近期國內(nèi)外的文獻(xiàn)報道進(jìn)行檢索、分類和整理。對新型凝膠劑(主要是智能凝膠劑)、凝膠劑輔料、凝膠劑性質(zhì)考察方法等方面進(jìn)行綜述 。[詳細(xì)]

  2018-08-02 16:37

  期刊論文

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 糕點(diǎn)和面包中脫氫乙酸兩種不同檢測方法的比較研究---意大利VELP電磁攪拌器

  摘要：對蛋糕、桃酥、沙琪瑪?shù)雀恻c(diǎn)和面包中脫氫乙酸含量的兩種標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法進(jìn)行了對比分析,比較研究了采用不同標(biāo)準(zhǔn)方法對同一樣品中脫氫乙酸含量檢測結(jié)果的影響。試驗(yàn)結(jié)果表明,采用不同的標(biāo)準(zhǔn)檢測方法,脫氫乙酸含量檢測值基本一致。氣相色譜法和液相色譜法檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性均好,精密度均能滿足糕點(diǎn)和面包樣本檢測的實(shí)際需求。 關(guān)鍵詞：糕點(diǎn);面包;脫氫乙酸;檢測; [詳細(xì)]

  2024-10-10 09:56

  期刊論文

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 核酸污染清除劑彩頁

  本產(chǎn)品相關(guān)內(nèi)容參數(shù)介紹[詳細(xì)]

  2022-10-13 15:18

  產(chǎn)品樣冊

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 咖啡中粗脂肪的提取及含量測定（索氏提取法）

  隨著生活質(zhì)量的不斷提高，人們開發(fā)出了各式各樣的飲料產(chǎn)品，但也有一些假冒偽劣產(chǎn)品充斥其中，因此為了評判咖啡的品質(zhì)，通常情況下人們通過測試咖啡中脂肪的含量多少來進(jìn)行評估。[詳細(xì)]

  2024-09-14 19:10

  應(yīng)用文章

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 兩種顆粒度儀的測試比較研究

  兩種顆粒度儀的測試比較研究[詳細(xì)]

  2015-07-22 00:00

  實(shí)驗(yàn)操作

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 海能儀器：花生粗脂肪含量測定（索氏提取法）

  海能儀器：花生粗脂肪含量測定（索氏提取法）[詳細(xì)]

  2024-09-20 06:16

  期刊論文

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 硅酸鹽水泥熟料的XRD檢測與化學(xué)方法檢測結(jié)果的比較分析

  硅酸鹽水泥熟料的XRD檢測與化學(xué)方法檢測結(jié)果的比較分析[詳細(xì)]

  2024-09-27 23:50

  產(chǎn)品樣冊

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 增加RT-PCR靈敏度的方法

  增加RT-PCR靈敏度的方法RT--PCR增加RT-PCR靈敏度的方法（一）分離高質(zhì)量RNA成功的cDNA合成來自高質(zhì)量的RNA。高質(zhì)量的RNA至少應(yīng)保證全長并且不含逆轉(zhuǎn)錄酶的YZ劑，如EDTA或SDS。RNA的質(zhì)量決定了你能夠轉(zhuǎn)錄到cDNA上的序列信息量的Zda值。一般的RNA純化方法是使用異硫氰酸胍／酸性酚的一步法。Trizol試劑法將一步法加以提高，可以從多種組織和細(xì)胞中提取高質(zhì)量的非降解RNA。Trizol試劑法可以從Z少100個細(xì)胞或1mg組織中提取RNA。一般不必使用oligo（dT）選擇性分離poly（A）+RNA。不管起始模板是總RNA還是poly（A）+RNA，都可以檢測到擴(kuò)增結(jié)果。另外，分離poly（A）+RNA會導(dǎo)致樣品間mRNA豐度的波動變化，從而使信息的檢出和定量產(chǎn)生偏差。然而，當(dāng)分析稀有mRNA時，poly（A）+RNA會增加檢測的靈敏度。為了防止痕量RNase的污染，從富含RNase的樣品（如胰臟）中分離到的RNA需要貯存在甲醛中以保存高質(zhì)量的RNA，對于長期貯存更是如此。從大鼠肝臟中提取的RNA，在水中貯存一個星期就基本降解了，而從大鼠中提取的RNA，在水中保存3年仍保持穩(wěn)定。另外，長度大于4kb的轉(zhuǎn)錄本對于痕量RNase的降解比小轉(zhuǎn)錄本更敏感。為了增加貯存RNA樣品的穩(wěn)定性，可以將RNA溶解在去離子的甲酰胺中，存于-70℃。用于保存RNA的甲酰胺一定不能含有降解RNA的雜物。來源于胰臟的RNA至少可以在甲酰胺中保存一年。當(dāng)準(zhǔn)備使用RNA時，可以使用下列方法沉淀RNA：加入NaCl至0.及4倍體積的乙醇，室溫放置3-5分鐘，10,000×g離心5分鐘。在逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)中經(jīng)常加入RNaseYZ劑以增加cDNA合成的長度和產(chǎn)量。RNaseYZ劑要在**鏈合成反應(yīng)中，在緩沖液和還原劑（如DTT）存在的條件下加入，因?yàn)閏DNA合成前的過程會使YZ劑變性，從而釋放結(jié)合的可以降解RNA的RNase。蛋白RNaseYZ劑僅防止RNaseA，B，C對RNA的降解，并不能防止皮膚上的RNase，因此盡管使用了這些YZ劑，也要小心不要從手指上引入RNase。2M（二）使用無RNaseH活性（RNaseH-）的逆轉(zhuǎn)錄酶逆轉(zhuǎn)錄酶催化RNA轉(zhuǎn)化成cDNA。不管是M-MLV還是AMV，在本身的聚合酶活性之外，都具有內(nèi)源RNaseH活性。RNaseH活性同聚合酶活性相互競爭RNA模板與DNA引物或cDNA延伸鏈間形成的雜合鏈，并降解RNA：DNA復(fù)合物中的RNA鏈。被RNaseH活性所降解的RNA模板不能再作為合成cDNA的有效底物，降低了cDNA合成的產(chǎn)量和長度。因此消除或大大降低逆轉(zhuǎn)錄酶的RNaseH活性將會大有裨益。SuperScriptⅡ逆轉(zhuǎn)錄酶，RNaseH-的MMLV逆轉(zhuǎn)錄酶及ThermoScript逆轉(zhuǎn)錄酶，RNaseH-的AMV，比MMLV和AMV得到更多量和更多全長的cDNA。RT-PCR靈敏度會受cDNA合成量的影響。ThermoScript比AMV的靈敏性強(qiáng)得多。RT-PCR產(chǎn)物的大小受限于逆轉(zhuǎn)錄酶合成cDNA的能力，尤其是克隆較大的cDNA時。同MMLV相比，SuperScripⅡ顯著提高了長RT-PCR產(chǎn)物的產(chǎn)量。RNaseH-的逆轉(zhuǎn)錄酶同時增加了熱穩(wěn)定性，所以反應(yīng)可以在高于正常的37-42℃的溫度下進(jìn)行。在建議的合成條件下，使用oligo（dT）引物和10μCi的[α-P]dCTP。**鏈的總產(chǎn)量使用TCA沉淀法計(jì)算。全長cDNA使用在堿性瓊脂糖膠上將大小分類的條帶切除并計(jì)數(shù)的方法分析。（三）提高逆轉(zhuǎn)錄保溫溫度較高的保溫溫度有助于RNA二級結(jié)構(gòu)的打開，增加了反應(yīng)的產(chǎn)量。對于多數(shù)RNA模板，在沒有緩沖液或鹽的條件下，將RNA和引物在65℃保溫，然后迅速置于冰上冷卻，可以消除大多數(shù)二級結(jié)構(gòu)，從而使引物可以結(jié)合。然而某些模板仍然會存在二級結(jié)構(gòu)，即使熱變性后也是如此。對這些困難模板的擴(kuò)增可以使用ThermoScript逆轉(zhuǎn)錄酶，并將逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)置于較高溫度下進(jìn)行以改善擴(kuò)增。較高的保溫溫度也可以增加特異性，尤其是當(dāng)使用基因特異性引物（GSP）進(jìn)行cDNA合成時。如果使用GSP，確保引物的Tm值與預(yù)計(jì)的保溫溫度相同。不要在高于60℃時使用oligo（dT）和隨機(jī)引物。隨機(jī)引物需要在增加到60℃前在25℃保溫10分鐘。除了使用較高的逆轉(zhuǎn)錄溫度外，還可以通過直接將RNA/引物混合物從65℃變性溫度轉(zhuǎn)到逆轉(zhuǎn)錄保溫溫度，并加入預(yù)熱的2×的反應(yīng)混合物提高特異性（cDNA熱啟動合成）。這種方法有助于防止較低溫度時所發(fā)生的分子間堿基配對。使用PCR儀可以簡化RT-PCR所需的多種溫度切換。Tth熱穩(wěn)定聚合酶在Mg2+存在條件下作為DNA聚合酶，在Mn2+存在條件下作為RNA聚合酶。它可以在Z高65℃條件下保溫。然而，PCR過程中Mn2+的存在會降低忠實(shí)性，這使得Tth聚合酶不太適合用于高極ng確度的擴(kuò)增，如cDNA的克隆。另外，Tth的逆轉(zhuǎn)錄效率較低，這會降低靈敏度，而且，既然單個酶就可以進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄和PCR，那么沒有逆轉(zhuǎn)錄的對照反應(yīng)就不能用來將cDNA的擴(kuò)增產(chǎn)物同污染的基因組DNA的擴(kuò)增產(chǎn)物區(qū)分開來。（四）促進(jìn)逆轉(zhuǎn)錄的添加劑包括甘油和DMSO在內(nèi)的添加劑加到**鏈合成反應(yīng)中，可以減低核酸雙鏈的穩(wěn)定并解開RNA二級結(jié)構(gòu)，Z多可以加入20％的甘油或10％的DMSO而不影響SuperScriptⅡ或MMLV的活性。AMV也可以耐受Z多20％的甘油而不降低活性。為了在SuperScriptⅡ逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)中Zda限度提高RT-PCR的靈敏度，可以加入10％的甘油并在45℃保溫。如果1/10的逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)產(chǎn)物加入到PCR中，那甘油在擴(kuò)增反應(yīng)中的濃度為0.％，這不足以YZPCR。4（五）RNaseH處理在PCR之前使用RNaseH處理cDNA合成反應(yīng)可以提高靈敏度。對于某些模板，據(jù)認(rèn)為cDNA合成反應(yīng)中的RNA會阻止擴(kuò)增產(chǎn)物的結(jié)合，在這種情況下，RNaseH處理可以增加靈敏度。一般當(dāng)擴(kuò)增較長的全長cDNA目標(biāo)模板時，RNaseH處理是必需的，比如低拷貝的tuberousscherosisⅡ（圖7）。對這種困難模板，RNaseH的處理加強(qiáng)了SuperScriptⅡ或AMV合成的cDNA所產(chǎn)生的信號。對于多數(shù)RT-PCR反應(yīng)，RNaseH處理是可選的，因?yàn)?5℃保溫的PCR變性步驟一般會將RNA：DNA復(fù)合物中的RNA水解掉。（六）小量RNA檢測方法的提高當(dāng)僅有小量RNA時，RT-PCR尤其具有挑戰(zhàn)性。在RNA分離過程中加入的作為載體的糖元有助于增加小量樣品的產(chǎn)量。可以在加入Trizol的同時加入無RNase的糖元。糖元是水溶性的，可以同RNA保持在水相中以輔助隨后的沉淀。對于小于50mg的組織或106個培養(yǎng)細(xì)胞的樣品，無RNase糖元的建議濃度為250μg/ml。在使用SuperScriptⅡ的逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)中加入乙酰化BSA可以增加靈敏度，而且對于小量RNA，減少SuperScriptⅡ的量并加入40單位的RnaseOut核酸酶YZ劑可以提高檢測的水平。如果在RNA分離過程中使用了糖元，仍然建議在使用SuperScriptⅡ進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)時加入BSA或RNaseYZ劑。（七）一步法同兩步法RT-PCR的比較兩步法RT-PCR比較常見，在使用一個樣品檢測多個mRNA時比較有用。然而一步法RT-PCR具有其他優(yōu)點(diǎn)。一步法RT-PCR在處理大量樣品時易于操作，有助于減少殘余污染，因?yàn)樵赾DNA合成和擴(kuò)增之間不需要打開管蓋。一步法可以得到更高的靈敏度，Zdi可以達(dá)到0.總RNA，這是因?yàn)檎麄€cDNA樣品都被擴(kuò)增。對于成功的一步法RT-PCR，一般使用反義的基因特異性引物起始cDNA合成1pg[詳細(xì)]

  2024-09-29 07:29

  產(chǎn)品樣冊

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 兩種橫向石墨管原子化性能的比較

  兩種橫向石墨管原子化性能的比較[詳細(xì)]

  2005-06-06 00:00

  期刊論文

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 大氣硫酸鹽化速率的兩種分析方法比較

  本文主要用瑞士萬通離子色譜與改良硫酸鋇比濁法對大氣硫酸鹽化速率進(jìn)行分析。通過曲線分析,空白實(shí)驗(yàn),加標(biāo)回收率分析,證明兩種方法有良好的線性與準(zhǔn)確性;對5個不同點(diǎn)位的堿片分析并通過t檢驗(yàn)法進(jìn)行檢驗(yàn),說明兩種方法無明顯差異。[詳細(xì)]

  2018-08-17 10:00

  產(chǎn)品樣冊

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 人冠狀病毒(Coronaviruses IgG)檢測試劑盒

  人冠狀病毒(Coronaviruses IgG)檢測試劑盒[詳細(xì)]

  2015-03-13 00:00

  報價單

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 同種包裝材料不同表面摩擦系數(shù)的比較

  同種包裝材料不同表面摩擦系數(shù)的比較[詳細(xì)]

  2024-03-06 11:00

  應(yīng)用文章

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 不同微量熱儀的技術(shù)比較

  不同微量熱儀的技術(shù)比較[詳細(xì)]

  2024-09-27 23:54

  課件

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 不同材質(zhì)薄膜收縮性能的比較

  不同材質(zhì)薄膜收縮性能的比較[詳細(xì)]

  2024-06-06 10:38

  應(yīng)用文章

  |

  • 
  • 
  • 
  •