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1. 提取: 將樣品充分均質,準確稱取2.0g樣品,加入20ml提取劑*,混勻;超聲提取10min,6000r/min離心3min,收集上清液。將提取劑減半,按以上步驟重復提取兩遍,合并上清液;將上清液于45℃、真空度-0.96Mpa的條件下旋轉蒸發至2ml,再加入80ul甲酸,混勻,作為待凈化液。 提取劑*:氨水+70%乙醇(1+99,體積比) 2.SPE凈化:(PLS,500mg/6ml)(Cat.#68005) 活化:依次5ml甲醇、5ml水,棄去流出液; 上樣:將待凈化液加入至小柱中,棄去流出液; 淋洗:加入4ml 水,棄去流出液,將SPE柱抽干; 洗脫:加入6ml 2%氨水-甲醇溶液,收集流出液,在45℃下氮吹至約0.5ml,用水定容至1ml,混勻,作為待測液。
色譜條件: 色譜柱:Diamonsil C18(2) 250×4.6mm,5.0um(Cat.#99603) 進樣量:20uL 流速:1.0mL/min 柱溫:35℃ 檢測波長:254nm 流動相A:0.05mol/L乙酸銨 流動相B:乙腈
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