2022年Z 新版食品安全抽檢實施細則更新了針對于豬、雞肌肉、肝臟和魚、蝦可食性組織中氯霉素殘留檢測的檢測方法——《GB 31658.2-2021 動物性食品中氯霉素殘留量的測定 液相色譜-串聯質譜法》。

逗點生物參照該標準進行試驗，并優化了部分參數，建立了一份具有良好回收率及穩定性，能滿足國標要求的SPE-HPLC-MS/MS方法，可供參考。

01

樣品提取

準確稱取粉碎均勻的肉類樣品5 g（精確至0.02 g）于干凈離心管中，加內標工作液100 μL，加入10 mL 乙腈和10 mL 4% NaCl水溶液，渦旋提取10 min，8000 r/min離心10 min。

取出上清液于另一干凈離心管，向離心管中加入10 mL正己烷，渦旋震蕩1 mim，8000 r/min離心2 min，棄上清液，于離心管中加入8 mL水飽和的乙酸乙酯溶液，渦旋震蕩2 min，8000 r/min離心2 min，取出上層清液，氮吹干，用5 mL 5%乙腈-水溶液復溶，待凈化。

本方案所運用到的氮吹儀器

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02

樣品凈化

Copure? C18，500mg/3mL

活化：取固相萃取柱依次用5 mL甲醇，5 mL水進行活化；

上樣：將上述待凈化液加入固相萃取柱中；

淋洗：分別取6 mL水分兩次淋洗固相萃取柱；

洗脫：加入8 mL甲醇進行洗脫，收集全部洗脫液，氮吹干，1 mL 50%甲醇水溶液復溶，過尼龍濾膜，上機。

03

標準曲線溶液的配制

內標CAP-D5工作液：50 ng/mL，氯霉素工作液10 ng/mL、50 ng/mL。

表1 標準溶液配制方法

04

儀器條件

（1）色譜條件

儀器：UPLC-MS/MS

（Thermo Fisher TSQ Endura）

色譜柱：Hypersil GOLD C18

 (2.1 mm×100 mm，1.9 μm)

 流動相：A：水  B：甲醇

 洗脫方式：梯度洗脫，見表2

 流速：0.3 mL/min

 柱溫：30℃

 進樣量：20 μL

表2 梯度洗脫程序

（2）質譜條件

離子源：HESI          電噴霧電壓：3500 V

鞘氣壓力：40 arb      輔氣壓力：10 arb

離子傳輸管：380 ℃   輔氣溫度：350 ℃

表3 組分名稱、保留時間

及特征離子一覽表（*為定量離子）

05

實驗結果

表4  氯霉素加標回收實驗結果

圖1 添加水平為0.1 μg/kg時

豬肉中氯霉素的總離子流圖

圖2 添加水平為0.1 μg/kg時

雞肉中氯霉素的總離子流圖

圖3 添加水平為0.1 μg/kg時

蝦肉中氯霉素的總離子流圖

06

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