Copure 黃曲霉毒素總量免疫親和柱:國貨之光,為降本增效添一抹亮色
在2025年,食品檢測機構因檢測耗材成本高等問題,急需降本增效。自2006年創立后,憑借在生命科學領域的深厚技術底蘊和強大創新能力,推出的Copure黃曲霉毒素總量免疫親和柱性能卓越。該產品在關鍵指標(如回收率)上與進口競品相當,在針對花生油中黃曲霉毒素B族和G族的測定實驗中,不同毒素種類及多樣的加標濃度下,與進口產品回收率難分高下,且檢測準確度和可靠性與進口產品相媲美。
提取
稱取花生油5g(精確至0.01g)于50mL離心管中,準確加入20mL乙腈-水溶液(84+16),渦旋混勻,于渦旋振蕩器振蕩上振蕩20min,10000r/min離心5min。準確移取4mL上清液加入46mLPBS稀釋混勻,作為上樣液。
PBS緩沖鹽溶液:稱取8.00g氯化鈉、1.20g磷酸氫二鈉、0.20g磷酸二氫鉀、0.20g氯化鉀,用900mL水溶液,用鹽酸調節pH至7.0,用水定容至1000mL。
凈化
先將低溫下保存的免疫親和柱恢復至室溫。免疫親和柱上接上50mL注射器筒,將上樣液加入到50mL注射器筒后,再擰開下端的下蓋,和親和柱保護液一起流出,控制樣液以1mL/min-3mL/min的速度穩定下滴。待樣液滴完后,往注射器筒內加入2х10mL水。待水滴完后,壓干小柱,在親和柱下部放置15mL離心管,取下50mL注射器筒,2х1mL甲醇洗脫親和柱,控制樣液以1mL/min-3mL/min的速度下滴,最后壓干小柱,收集全部洗脫液。在45℃下氮吹至近干,加入1mL 50%甲醇水復溶,過0.22μm親水PTFE濾膜,上機測試。
設備:島津Shimadzu LC-20A液相色譜儀
色譜柱:Copure真菌毒素專用HPLC柱(4.6 mm×250 mm,5 μm)
檢測器:熒光檢測器(激發360nm 發射440nm)
光化學柱后衍生器
流動相:水-甲醇(55+45,v/v)
洗脫方式:等度洗脫
流速:1 mL/min
進樣體積:10 μL
測試譜圖
圖1 黃曲霉毒素B1、G1曲線濃度點為0.5ng/mL, 黃曲霉毒素B2、G2曲線濃度點為0.25ng/mL的液相色譜圖
圖2 花生油中黃曲霉毒素B1、G1添加濃度為1ng/mL,黃曲霉毒素B2、G2添加濃度為0.5ng/mL的液相色譜圖(Copure)
圖3 花生油中黃曲霉毒素B1、G1添加濃度為1ng/mL,
黃曲霉毒素B2、G2添加濃度為0.5ng/mL的液相色譜圖(進口R)
實驗中使用到的玻璃器皿或者離心管,一定要清洗干凈,尤其是用次氯酸等處理過的,否則會使結果偏低。
上樣前樣液中的有機相的濃度甲醇不超過10%,乙腈不超過20%,除此之外建議過濾紙,能除掉顆粒較大的雜質。無法滿足時可用離心代替,使樣液澄清。
稀釋后的樣液建議30min內上柱,放置時間久會有沉淀析出,會反過來吸附毒素,也會堵柱,影響過柱的效果。
免疫親和柱最適使用溫度為25℃左右,上樣和淋洗前避免干柱,干柱的時間越久,凝膠收縮得越厲害,結果不理想。
當用氮氣濃縮洗脫液時,氮氣流不要太大,否則會損失部分目標物。
在依據 GB 5009.22-2016 《食品安全國家標準 食品中黃曲霉毒素 B 族和 G 族的測定》對柱子進行驗收時,通常要確保加標量與柱子的柱容量相匹配。尤其是采用黃曲霉毒素 B 族和 G 族混標進行驗證時,必須考慮黃曲霉毒素 B 族和 G 族標液的總量,防止出現回收率驗證結果偏低的情況。另外,您也可以選購Copure?高柱容量的黃曲霉毒素總量免疫親和柱防止這種情況發生。
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