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2025-01-10 17:04:37氣相色譜測定方法: 氣相色譜測定方法是一種常用的化學分析方法，它利用不同物質在氣相中對固定相的相對吸附或溶解能力不同，當混合物隨流動相流經色譜柱時，各組分在兩相間進行反復多次分配，使得原本微量的組分得以分離，并依據組分在檢測器中的響應值進行定量。該方法具有高效能、高選擇性、高靈敏度及用量少、分析速度快等優點，廣泛應用于環境分析、食品檢測、藥物分析等領域。通過氣相色譜圖，可以了解樣品的組成及各組分的相對含量。

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【標客一譜】GB 31604.39-2016食品安全國家標準食品接觸材料及制品食品接觸用紙中多氯聯苯的測定-9種多氯聯苯混標

本標準規定了食品接觸用紙中多氯聯苯的氣相色譜測定方法及氣相色譜-質譜測定方法。

曼哈格（上海）生物科技有限公司 372
2022-08-01
氣相色譜測定方法氣相色譜-質譜測定方法食品接觸材料

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氣相色譜測定方法問答

2023-12-15 17:17:08蛋白質濃度測定的各種方法及原理有哪些？: 蛋白質濃度測定的各種方法及原理是生物化學和分子生物學實驗中的重要環節。蛋白質濃度的準確測定對于研究生物分子相互作用、蛋白質功能和動力學、以及生物樣品的分析和鑒定等方面都具有重要的意義。本文將介紹幾種常用的蛋白質濃度測定方法及其原理，包括紫外吸收法、微量凱氏定氮法、雙縮尿法、Lowry 法和考馬斯亮藍法等。通過對這些方法的比較和分析，可以更好地了解它們的優缺點，以便根據實際實驗需求選擇合適的方法來測定蛋白質濃度。 ①紫外吸收法檢測原理：蛋白質分子中，酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸殘基的苯環含有共扼雙鍵，使蛋白質具有吸收紫外光的性質。吸收高峰在280nm處，其吸光度（即光密度值）與蛋白質含量成正比。此外，蛋白質溶液在238nm的光吸收值與肽鍵含量成正比。利用一定波長下，蛋白質溶液的光吸收值與蛋白質濃度的正比關系，進行蛋白質含量的測定。方法特點：優點：簡便、靈敏、快速，不消耗樣品，測定后仍能回收使用。缺點：測定蛋白質含量的準確度較差，干擾物質多。干擾物：含有嘌呤、嘧啶、核酸等吸收紫外光的物質。檢出限：50~100ug蛋白含量。適用范圍：適于用測定與標準蛋白質氨基酸組成相似的蛋白質。 ②微量凱氏定氮法凱氏定氮法被國內外視為蛋白質含量的標準檢驗方法，可作為衡量其他蛋白質含量檢測方法準確性的標準。實驗原理：樣品與濃硫酸共熱，含氮有機物即分解產生氨（消化），氨又與硫酸作用，變成硫酸氨。經強堿堿化使之分解放出氨，借蒸汽將氨蒸至酸液中，根據此酸液被中和的程度可計算得樣品之氮含量。方法特點：優點：通用性強，測定費用低，易實現，儀器簡單且測定結果的重復性和重現性好。缺點：實驗耗時長、靈敏度低。檢出限：0.2~1mg蛋白含量。適用范圍：凱氏定氮法測的是總蛋白的量，一些非蛋白氮無法檢測出。 ③雙縮尿法實驗原理：雙縮尿（NH3CONHCONH3）是兩個分子經180℃左右加熱，放出一個分子氨后得到的產物。在強堿溶液中，雙縮尿與CuSO4形成紫色絡合物，稱為雙縮尿反應。凡具有兩個酰胺基或兩個直接連接的肽鏈，或能過一個中間碳原子相連的肽鍵，這類化合物都有雙縮尿反應。紫色絡合物顏色的深淺與蛋白質濃度成正比，與蛋白質分子量及氨基酸成分無關。方法特點：優點：適合檢測總蛋白質的含量，操作簡單、測量速度快。缺點：標準物質必須使用代表性很強的樣品，需使用其他參考方法測出標準物質中的蛋白質總含量，故測定工作費力費時。不宜測定樣品種類多、彼此差異大的樣品。檢出限：測定蛋白質含量測定范圍為1-20mg蛋白質。干擾物：硫酸銨、Tris緩沖液和某些氨基酸等。適用范圍：常用于需要快速，但并不需要十分精確的蛋白質測定。 ④Lowry 法 Lowry 法是雙縮脲法的發展，結合了雙縮脲試劑和酚試劑與蛋白質的反應，是最靈敏的蛋白質測定方法之一，在生物化學領域得到廣泛的應用，目前分為基本法和改良簡易法，改良簡易法可獲得與基本法相近的結果。基本法實驗原理：顯色原理與雙縮尿法相同，但加入了Folin-酚酞試劑，以增加顯色量，從而提高檢測蛋白質的靈敏度。這兩種顯色反應產生深蘭色的原因是：①在堿性條件下，蛋白質中的肽鍵與銅結合生成復合物。②Folin一酚試劑中的磷鉬酸鹽一磷鎢酸鹽被蛋白質中的酪氨酸和苯丙氨酸殘基還原，產生深蘭色（鉬蘭和鎢蘭的混合物）。在一定的條件下，蘭色深度與蛋白的量成正比。特點：優點：靈敏度高。缺點：耗費時間長，操作時間需精-準控制，標準曲線繪制麻煩，專一性較差，干擾物質比較多。檢出限：可檢測的最-低蛋白質量達5ug。通常測定范圍是20~250ug。干擾物：酚類、檸檬酸、硫酸銨、Tris緩沖液、甘氨酸、糖類、甘油等。適用范圍：除蛋白含量測定，也可用于酪氨酸和色氨酸的定量測定。 ⑤考馬斯亮藍法實驗原理：考馬斯亮藍G-250染料，在酸性溶液中與蛋白質結合，使染料的最-大吸收峰的位置（max），由465mm變為595nm，溶液的顏色也由棕黑色變為藍色。經研究認為，染料主要是與蛋白質中的堿性氨基酸（特別是精氨酸）和芳香族氨基酸殘基相結合。在595mm下測定的吸光度值A595，與蛋白質濃度成正比。方法特點：優點：靈敏度比Lowry高約4倍，高效率、檢測過程簡便、只需要一種試劑，抗干擾能力強。缺點：測定誤差大，不適用于不同蛋白的檢測。檢出限：其最-低蛋白質檢測量可達1ug。干擾物：干擾物質少，但去污劑、TritonX-100、十二烷基硫酸鈉、0.1N的NaOH會干擾實驗測定。蛋白質含量測定方法選擇蛋白質含量測定時，考慮以下因素后選定適用的檢測方法。 ①實驗對測定所要求的靈敏度和精確度； ②蛋白質的性質； ③溶液中存在的干擾物質； ④測定所要花費的時間。義翹神州提供多種類型的蛋白資源，不僅有重組蛋白服務還有各種大咖講座，詳情可以關注https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review

2020-08-11 11:02:17氣相色譜測定氫氣含量的方法是什么？: 氣相色譜測定氫氣含量的方法是什么？

2020-09-14 16:58:49氣相色譜測定順酐含量的方法是什么？: 氣相色譜測定順酐含量的方法是什么？

2022-11-10 22:16:02測定玻璃化轉變溫度的常用方法-低場核磁共振法: 測定玻璃化轉變溫度的常用方法-低場核磁共振法什么是玻璃化轉變溫度？玻璃化轉變溫度是指由高彈態轉變為玻璃態或玻璃態轉變為高彈態所對應的溫度。玻璃化轉變是非晶態高分子材料固有的性質，是高分子運動形式轉變的宏觀體現，它直接影響到材料的使用性能和工藝性能，因此長期以來它都是高分子物理研究的主要內容。玻璃化轉變溫度是高分子聚合物的特征溫度之一。以玻璃化溫度為界，高分子聚合物呈現不同的物理性質：在玻璃化溫度以下，高分子材料為塑料；在玻璃化溫度以上，高分子材料為橡膠。從工程應用角度而言，玻璃化溫度是工程塑料使用溫度的上限，是橡膠或彈性體的使用下限。玻璃化轉變的影響因素由于玻璃化轉變是與分子運動有關的現象，而分子運動又和分子結構有著密切關系，所以分子鏈的柔順性、分子間作用力以及共聚、共混、增塑等都是影響高聚物Tg的重要內因。此外，外界條件如作用力、作用力速率，升(陣)溫速度等也是值得注意的影響因索。在玻璃化轉變溫度以上，高聚物表現出彈性；在玻璃化轉變溫度以下，高聚物表現出脆性，在用作塑料、橡膠、合成纖維等時必須加以考慮。如聚氯乙烯的玻璃化溫度是80℃。但是，他不是制品工作溫度的上限。比如，橡膠的工作溫度必須在玻璃化溫度以上，否則就失去高彈性。測定玻璃化轉變溫度的常用方法：1．膨脹計法：在膨脹計內裝入適量的受測聚合物，通過抽真空的方法在負壓下將對受測聚合物沒有溶解作用的惰性液體充入膨脹計內，然后在油浴中以一定的升溫速率對膨脹計加熱，記錄惰性液體柱高度隨溫度的變化。由于高分子聚合物在玻璃化溫度前后體積的突變，因此惰性液體柱高度-溫度曲線上對應有折點。折點對應的溫度即為受測聚合物的玻璃化溫度。2．折光率法：利用高分子聚合物在玻璃化轉變溫度前后折光率的變化，找出導致這種變化的玻璃化轉變溫度。3．熱機械法（溫度-變形法）在加熱爐或環境箱內對高分子聚合物的試樣施加恒定載荷；記錄不同溫度下的溫度-變形曲線。類似于膨脹計法，找出曲線上的折點所對應的溫度，即為：玻璃化轉變溫度。4．DTA法（DSC）：以玻璃化溫度為界，高分子聚合物的物理性質隨高分子鏈段運動自由度的變化而呈現顯著的變化，其中，熱容的變化使熱分析方法成為測定高分子材料玻璃化溫度的一種有效手段。5．動態力學性能分析（DMA）法：高分子材料的動態性能分析（DMA）通過在受測高分子聚合物上施加正弦交變載荷獲取聚合物材料的動態力學響應。6．低場核磁共振法：NMR是一種通過測定活性原子核的弛豫特性來描述分子運動特性的技術。用NMR測定玻璃化轉變溫度是基于弛豫時間(T1、T2)可以衡量玻璃化轉變時分子鏈段運動的急劇變化。與上述方法相比，NMR對所測食品樣品沒有限制，對樣品亦不具破壞性，靈敏度高，能夠快速、實時、荃方位、定量的研究樣品。玻璃化轉變是指非晶態的高聚物（包括晶態高聚物中的非晶體部分）從玻璃態到高彈態的轉變或者從高彈態到玻璃態的轉變。許多研究人員已經接受食品也是聚合物這一觀點并將其作為聚合物體系進行分析，聚合物玻璃化轉變的基礎是分子運動，聚合物由玻璃態轉變為橡膠態時，含有質子的基團運動頻率增加，這些變化可由弛豫時間T1和T2來衡量。當聚合物處于玻璃態時，T2不隨溫度而變，表現出剛性晶格的性質，玻璃化轉變后，突破剛性晶格的限制，T2隨溫度升高而增大。繪制T2-溫度曲線，T2轉折點所對應的溫度即玻璃化轉變溫度Tg。T2-溫度曲線和T1-溫度曲線都是由兩條近似直線的不同斜率的直線部分組成，這兩條直線的交點就看作為相轉變點，所對應的溫度就是相轉變溫度，即我們所要測定的Tg。對于“U”曲線，其蕞低點，即為相轉變點，所對應溫度為Tg。

2022-02-24 13:07:17AOAC 2001.02 低聚半乳糖測定方法改進: 近些年來隨著健康意識的提高，人們對于食品添加劑和膳食補充劑的興趣不斷增加，如低聚半乳糖等益生元開始引起人們的關注。食品和食品補充劑中低聚半乳糖的含量必須滿足安全和相關法規的要求，如 GB 14880-2012 《食品安全國家標準食品營養強化劑使用標準》中規定嬰幼兒谷類輔助食品和嬰幼兒配方食品中低聚半乳糖（乳糖來源）、低聚半乳糖（乳清濾出液來源）含量不得超過64.5g/kg。目前對于低聚半乳糖的檢測，應用最廣泛的是通過酶水解將其分解為小分子糖，然后進入色譜分析。目前國內低聚半乳糖的標準檢測方法尚未正式發布，因此本文以 AOAC 2001.02 方法為藍本進行描述并改進。使用配有安培檢測器的瑞士萬通離子色譜（IC-PAD）可對低聚半乳糖進行全自動分析。什么是低聚半乳糖?低聚半乳糖為在葡萄糖或半乳糖分子上鏈接1~7個半乳糖基的碳水化合物，是食品和飲料中少量天然存在的益生元。低聚半乳糖最初在人類母乳中發現，是母乳中的主要成分，其含量高達12g/L，因此被添加到嬰幼兒奶粉中作為益生元補充劑。低聚半乳糖可以在腸道中表現出雙岐化作用，調節腸道菌群，支持非致病細菌的生長。食品標簽對低聚半乳糖的要求全球益生元和低聚半乳糖市場的增長來自于消費者健康意識的提升，為回應這種意識提升，EU 1169/2011 和 EU 2015/2283 以及 GB 14880-2012 都對其含量做出了規定。因此我們必須對食品和營養補充劑中的低聚半乳糖進行測定。低聚半乳糖對人體健康影響的研究表明，每人每天攝入的低聚半乳糖建議不超過30g，嬰幼兒配方奶粉則需要執行更加嚴格的規定。AOAC 2001.02目前測量食品中低聚半乳糖最常用的方法就是 AOAC 標準方法 2001.02，國內相關標準的征求意見稿也是以此為參考。該方法是將低聚半乳糖從食品中提取出來之后將其水解為單糖，然后使用帶有安培檢測器的陰離子交換色譜進行分析。AOAC 2001.02 方法是將提取液與用β-半乳糖苷酶處理的水解液進行比較。在β-半乳糖苷酶催化下，糖苷鍵斷裂，低聚半乳糖和乳糖水解成葡萄糖和半乳糖。兩種溶液中測定的游離半乳糖和乳糖的濃度差即可用來計算低聚半乳糖含量（圖1）。圖1. 根據 AOAC 2001.02 方法測定低聚半乳糖含量的示意圖，以及瑞士萬通優化后的方法(綠色)。對AOAC方法的改進AOAC 2001.02 的樣品制備過程相當復雜：一方面是對照提取液需要加入昂貴的失活酶以維持提取液中各種糖濃度不變（圖 1）；另一方面，樣品是使用乙腈溶液稀釋，而標準品則是用超純水制備。本文中我們將簡化整個過程以提高方法的易用性和分析效率。實驗證明，在提取溶液中添加失活酶與否并不會影響提取物中葡萄糖、半乳糖和乳糖濃度，因此我們取消了該步驟，節省了大量的費用和手工勞動。總低聚半乳糖含量的測定，僅需測量不含任何酶的提取液和添加了活性酶的水解液即可完成。圖2. 某品牌益生元補充劑未處理(黑色)和酶處理(橙色)的疊加色譜圖。應用報告“如果想要了解更多分析細節您可以識別左側二維碼下載相關應用報告AN-P-087除了酶的使用，AOAC 方法還建議在超純水 (UPW) 中制備標準品，而用 20% 乙腈稀釋實際樣品。我們按照以下條件做了對比試驗：◆ 使用純水做校準曲線，純水稀釋樣品（純水）◆ 使用純水做校準曲線，乙腈稀釋樣品（AOAC方法）◆ 使用乙腈做校準曲線，乙腈稀釋樣品（乙腈）在以上三個條件中，低聚半乳糖含量的重現性在純水和 AOAC 方法之間表現類似，而乙腈方法中低聚半乳糖含量低于其它方法，乙腈似乎對樣品并不具有穩定作用。因此我們可以使用純水對樣品進行稀釋來改進 AOAC 方法，減少化學試劑的使用。結果總體而言，改進后的方法在分離度、回收率以及特異性方面表現出很好的穩定性，半乳糖檢出限為 0.1mg/L，葡萄糖和乳糖為 0.2mg/L，可以滿足低濃度樣品的測量需求。總結在糖類分析方面帶有安培檢測器的離子色譜法是一種靈敏、穩定且選擇性非常好的多組分分析方法，而且無需任何額外的衍生步驟。結合酶處理，離子色譜可以對非常復雜的糖類進行分析。本研究對食品中低聚半乳糖測定的 AOAC 方法進行了優化，雖然原理相同，但是分析效率得到大幅提升，可以大大降低實驗室時間和運行成本。如使用其它自動化樣品處理技術，如英藍邏輯稀釋技術和英藍自動校準技術，還可進一步提升工作效率。