長時間細胞動態成像及數據分析系統

IncuCyte Zoom：第二代長時間動態活細胞成像及數據分析系統

　　目前，大部分的細胞檢測方法采用的仍然是傳統的終點法——僅僅給出結果，而且往往需要標記細胞和破壞細胞。這種方法無法得到細胞在生長時的真正狀態，也無法對細胞的生長過程做出動態的監測和分析。美國Essen公司開發了第二代長時間實時動態活細胞成像分析儀——IncuCyte Zoom，用一種非侵入式的方法，記錄細胞的實時生長狀態。這種成像方法，被稱為“實時細胞內涵成像”（Live Content Imaging），擴充了用戶記錄和理解細胞生長、細胞行為和細胞形態的途徑。
IncuCyte Zoom是一套用于非傷害的、長時間實時動態的活細胞成像分析平臺。IncuCyte分為信號采集機和控制機兩部分，信號采集機可放置于培養箱中，中間放置多種規格尺寸的板、皿、瓶及載玻片，在其下方有顯微照相設備，通過顯微拍照，對培養細胞進行連續的監測，并通過聯網的電腦進行遠程控制、數據讀取與分析。系統可自動收集每個時間點的相差圖像和紅/綠熒光圖像。用戶除了可以得到各種格式的圖像或動態錄像外，還可以得到由系統軟件自動依據飽和度和計數分析生成的基于圖像應用的圖表，以顯示細胞的變化及趨勢。如顯示細胞增殖的飽和度vs時間圖表，顯示神經生長的神經突長度vs時間圖表，顯示Wound Hea領實驗的相對傷口密度vs時間圖表，或顯示新生血管的血管長度vs時間圖表。
IncuCyte的優勢：1）培養的細胞用高清晰度相差顯微鏡或熒光顯微鏡直接監測，為非破壞性的監測，細胞不用染色便可以觀察監測，影像效果好；2）監測過程中細胞無需離開培養箱，不用擔心培養條件的改變對細胞的影響；3）真正的長時間的動態活細胞成像，可達數天或數月，高清晰度相差成像能消除微孔板的彎液面缺陷（meniscus artifacts），且沒有傳統顯微系統的光暈問題，可以在384微孔板內監測細胞形態；4）圖像處理軟件自動依據飽和度和計數分析，量化細胞增殖；5）自動輸出細胞生長曲線和細胞生長錄像；6）實時監控，可改變傳統的“終點法”實驗方法，數據豐富，更準確、更靈活；7）高通量，可同時監測6塊標準規格的細胞培養板/皿/瓶/載玻片，包括96-孔微孔板和384-孔微孔板，細胞在384-孔微孔板內實驗，可以減少寶貴的藥品消耗；8）支持超過200種的標準培養容器，無需特殊的培養容器，節約后期實驗成本；9）可遠程監控，進行數據讀取和分析，無需反復出入細胞房，避免了潛在的污染隱患及人工出入觀測之麻煩。

不同濃度十字孢堿對 A549 腫瘤球體生長的影響 

（十） T 細胞免疫殺傷

應用IncuCyte ZOOM用于研究T細胞免疫殺傷腫瘤細胞的全過程和特異性，無需lift細胞或者使用Ab標記或放射性同位素方法。此外高清晰度圖像和動態影像可以很清楚的了解T細胞殺傷過程中潛在的生物學過程。

anti-CD3 和 IL-2 殺傷 SKOV3 NucLight Red? cells(2K/well) 與 PBMC’s  (20K/well) 混合培養過程 圖（已加入 caspase 3/7 試劑）

IncuCyte Zoom的應用總結：
1）監測細胞增殖（Proliferation）：通過實時動態成像，對細胞增殖進行非侵入性的、定量的分析；
2）細胞培養質控（Cell Culture QC）/細胞培養優化（Cell Culture Optimization）：通過實時動態成像，可生成基于細胞飽和度的動態生長曲線；
3）監測細胞毒性（Cytotoxicity）：將染料和細胞混合然后讀數，操作者可離開，是基于染料的實驗；
4）監測細胞凋亡（Apoptosis）：將凋亡試劑和細胞混合然后讀數，操作者可離開，是基于染料的實驗；
5）監測細胞遷移（Cell Migration）/細胞侵襲（Cell Invasion）：配套高度一致性的96孔傷口劃痕工具，實時動態監測傷口的愈合過程，可得到細胞運動的定量指標；
6）監測血管新生（Angiogenesis）：使用通過驗證的血管新生試劑盒，具有動態分析血管新生的定量指標；
7）監測報告基因（Reporter Gene）：細胞無需裂解，可獲得實時動態數據；
8）神經生長跟蹤（Kinetic NeuroTrack）：可定量分析神經元細胞的神經突的生長狀況。
9）3D腫瘤球體觀察（3D Spheroid）：可自動計算3D腫瘤球體的生長和收縮，實時動態地定量球體參數（如尺寸和熒光度）。
10）T細胞免疫殺傷： 用于研究 T 細胞免疫殺傷腫瘤細胞的全過程和特異性，無需 lift 細胞或者使用 Ab 標記或放射性同位素方法。