工作原理

無與倫比的光電檢測器

硅光電倍增管 (SiPM) 是基于硅基底的固態半導體器件，具備光子能級靈敏度，動態范圍為 7.2 個數量級，是一款具有光子計數功能的緊湊檢測器。NovoCyte Penteon 設計中的創新光學器件包含 30 個獨立的 SiPM，可收集并處理來自每個熒光通道的信號。

出色的散射光分辨率，可檢測小顆粒

NovoCyte Penteon 散射光檢測光學系統和信號處理電子器件經過優化，可以分辨粒徑小至 0.1 μm 的顆粒。憑借這種優異的分辨率，可輕松識別和分析血小板、細菌和各種亞微米顆粒。

高重現性和穩定性

NovoCyte Penteon 和 NovoCyte Quanteon 的液路系統專為提供高性能而設計。NovoCyte Penteon 和 NovoCyte Quanteon 擁有其他流式細胞儀無法比擬的液路一致性和穩定性。使用蠕動泵的其他儀器通常會受到液路脈動的影響，導致絕 對細胞計數不一致和不準確。

應用

凋亡分析

細胞凋亡也稱為細胞程序性死亡，是細胞調控自身死亡的過程，通過激活特定通路使細胞發生收縮、凝聚，并最 終通過吞噬作用被清除。這與壞死細胞死亡形成鮮明對比，壞死細胞死亡時細胞失控死亡并裂解，可產生免疫反應異常激活等有害影響。因此，凋亡細胞以非常有序的方式死亡，可限制其對周圍細胞和組織的破壞。

多種方法可用于測定細胞死亡并區分其為凋亡還是壞死。NovoCyte 流式細胞儀具有自動補償設置和寬熒光檢測動態范圍，可輕松對檢測進行定量，無需調整 PMT 電壓

免疫表型分析

免疫狀態與疾病狀態、治 療 效率以及對疫苗等外部刺激的反應有關。免疫表型分析可快速識別候選細胞類型、亞類和功能。由于免疫細胞可能影響疫苗的免疫原性及其效能，因此監測多種免疫細胞群的頻率以及特定細胞亞群（如單核細胞、NK 細胞、T 細胞和 B 細胞）的分化或活化狀態至關重要。NovoCyte 流式細胞儀可同時定量分析多種白細胞，以便更好地了解患者的免疫狀態并監測機體對傳染病的免疫反應。

細胞增殖

細胞增殖是一種重要功能，是高度結構化的事件，如果不受控制，會導致疾病。我們可以通過絕 對細胞計數或使用染料（例如 CFSE）測量增殖。當 CFSE 標記的細胞發生分裂時，染料在子細胞之間平均分配，隨著染料的不斷稀釋，我們可以測量 CFSE 熒光隨時間的損失。此外，還繪制染料的平均熒光強度 (MFI) 與細胞濃度隨時間的變化曲線，以揭示兩者之間的反比關系。這類分析方法通常用于觀察 T 淋巴細胞活化的變化。

圖：使用 CFSE 測量 Jurkat T 細胞增殖。A) 使用 CFSE 標記 Jurkat T 細胞，并通過 NovoCyte 流式細胞儀分析細胞隨時間的變化，以測定細胞分裂。每個峰值都對應于一個單獨的時間點。B) 使用隨細胞分裂產生的信號稀釋，繪制絕 對細胞計數與 CFSE 的平均熒光強度 (MFI) 隨時間的變化曲線。

細胞因子檢測

細胞因子是免疫細胞對病原體、自身免疫或治 療藥物的激活反應所必需的小分子。細胞因子的信號傳導可以調節基因調控、先天免疫反應和適應性免疫反應以及炎癥。因此，測量細胞因子產生并確定細胞因子產生的來源對于深入了解免疫反應非常重要?；谖⑶虻牧魇郊毎g檢測是測量細胞因子的高效方法，可以使用具有不同熒光強度的混合微球來測量單個樣品中的多種可溶性分析物。

細胞內蛋白質檢測

對細胞內蛋白質的檢測和分析有助于細胞亞群和細胞過程的額外表征。為分析非細胞表面蛋白質，需要進行細胞固定和破膜。然而，許多磷酸特異性抗體與許多基于去垢劑的常用破膜方法（用于細胞內染色）不兼容。在確定磷酸特異性抗體的適宜固定和破膜方法時，需要特別注意。最常見的方法是用 1.5% 多聚甲醛固定，然后用 100% 甲醇破膜。雖然這種方法適用于多種抗體，但請注意，并非每種磷酸特異性抗體都適用。

此外，在異質性樣品中鑒定不同的細胞群，需要對表面蛋白連接的磷酸化蛋白進行染色。必須特別考慮這些表位對固定劑的敏感性，并采取相應預防措施，避免損害表位。因此，樣品在固定前可能需要對特定的表面標記物進行染色

細胞周期分析

正常的人體細胞是含有恒定數量 DNA 的二倍體。在細胞分裂的過程中，DNA 合成導致總 DNA 含量翻倍，隨后在有絲分裂后恢復正常的 DNA 含量。利用 NovoCyte 流式細胞儀，可以進行詳細的細胞周期分析，了解腫瘤細胞分化、細胞轉化以及細胞與化合物之間的相互作用。

圖：在 10 μg/M MG132 或 500 μg/M 5-FU 處理 16 小時后，使用 ACEA NovoCyte 流式細胞儀分析 A549 細胞的細胞周期分布。NovoExpress 內置的細胞周期分析模塊中的圖像顯示了處于 G0/G1 期（綠色）、S 期