表面活性劑的存在如何影響蛋白質(zhì)與表面的相互作用?
蛋白質(zhì)傾向于與表面相互作用,這樣它們就可以展開和聚集。 一般而言,ZL性蛋白質(zhì)在溶液中的行為已被很好地表征,但通常并未研究其對各種表面材料的吸附和相互作用。 研究蛋白質(zhì)與各種表面材料和在不同溶液條件下的相互作用,可以評估材料的相容性和使其吸附Z小化的條件。 在這里,我們向您展示一種進(jìn)行此評估的方法。
蛋白質(zhì)傾向于吸附到表面
源于蛋白質(zhì)-表面相互作用的聚集可能會在藥物制造、存儲和分配的所有階段出現(xiàn)。 蛋白質(zhì)會遇到的典型材料可能是玻璃,金屬,塑料聚合物和油。 然而,可以通過添加輔料例如表面活性劑來增強蛋白質(zhì)穩(wěn)定性。 那么添加表面活性劑如何影響蛋白質(zhì)吸附到表面上呢? 吸附是被阻止還是被減少? 能否確定一組條件使吸附到表面的蛋白質(zhì)量Z小化?
在有或沒有輔料的情況下,使用QCM-D分析蛋白質(zhì)的吸附
蛋白質(zhì)吸附的性質(zhì)取決于蛋白質(zhì),表面,環(huán)境條件和使用的表面活性劑的特定組合。 在本文提出的研究中,使用QSense? QCM-D [1]分析了兩種不同的單克隆抗體在四種不同表面材料上的吸附。 在有或沒有表面活性劑存在下都進(jìn)行了吸附分析。
要回答的問題是:
? 多少抗體會吸附到各自的表面材料上?
? 添加表面活性劑將如何影響吸附?
? 是否有任何蛋白質(zhì),表面材料和輔料的組合會阻止吸附?
條件分析:
? 樣品:兩種單克隆抗體,mAb1,mAb2
? 表面:二氧化硅(SiO2),聚苯乙烯(PS),AF1600(聚四氟乙烯)和金(Au)
? 表面活性劑:聚山梨酯 80(PS-80)
蛋白質(zhì)-表面相互作用隨表面和溶液條件而變化
QCM-D結(jié)果(圖1)顯示了吸附量的顯著差異,具體取決于所測量的兩種抗體中的哪一種,所使用的表面材料以及是否存在輔料。
抗體:吸附的蛋白質(zhì)量隨所使用的抗體而異。 在所有研究的四種表面材料上,mAb2的表面吸附均比mAb1大。
表面材料:結(jié)果表明,表面材料顯著影響蛋白質(zhì)的吸附量。 在Au上吸附量ZG,而在PS上吸附量ZD。
輔料:溶液中表面活性劑的存在顯著降低了兩種抗體的吸附量。 對于抗體和材料的某些組合,當(dāng)添加表面活性劑時,基本上防止了吸附。 對于PS上的mAb1效果Z明顯。
圖1.針對四種不同表面材料的不可逆吸附抗體的質(zhì)量。 +和–表示表面活性劑的存在(+)或不存在(-)。
結(jié)束語
蛋白質(zhì)-表面相互作用可能觸發(fā)蛋白質(zhì)解折疊和聚集,并可能導(dǎo)致ZL性質(zhì)以及免疫原性反應(yīng)的喪失。 蛋白質(zhì)-表面相互作用的程度取決于許多因素,例如蛋白質(zhì)本身的性質(zhì),表面材料,pH,蛋白質(zhì)濃度,離子強度和輔料的存在等。在這項研究中,通過QCM-D分析表面的質(zhì)量吸附,確定了在定義的范圍內(nèi)Z小化蛋白質(zhì)-表面相互作用的條件。
下載附件應(yīng)用文摘以了解有關(guān)該研究的更多信息。
參考文獻(xiàn)
Oom, A., et al., J. Pharm. Sci., 101(2), 2012, 519-529
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