2021 年是中國細胞 治 療領域的元年，時至今日，6 款產品獲得 FDA 批準，3 款在中國上市。基于已發布的 2022 年上半年財報[1-4]，CAR-T 細胞治 療全 球總銷售額已超 10 億美金。

CAR-T 細胞制備流程包括以下幾個步驟：

① 抽取血樣，白細胞分離；

② 在 GMP 環境下，準備 CAR 基因，進行 CAR 基因轉導，獲取 CAR-T 細胞

③ CAR-T 細胞擴增，純化，并進行質量控制檢查；

④ 運送回治 療機構，病人先進行淋巴細胞清除化療，再輸注 CAR-T；

⑤ CAR-T 細胞識別并殺傷癌細胞。

Cancers 2021, 13, 5181（原始圖來自于 NCI-NIH）[5]

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血液腫瘤

CAR-T 細胞治 療，徹底改變了血液系統惡性腫瘤的治 療結果。CD19 CAR-T 臨床適應癥主要為難治性大 B 細胞淋巴瘤、濾泡性淋巴瘤、急性淋巴細胞性白血病等，BCMA CAR-T 則針對多發性骨 髓瘤。

CAR-T 總體反應率在 52-85%，完全應答率達到 33-59%[5-7]，優于單克隆抗體藥物（如Tafasitamab）、小分子抑 制劑（如Selinexor）、ADC 藥物（如Polatuzumab vedotin）等。

目前 FDA 已經批準了六款 CAR-T 細胞治 療產品，具體數據參考下表。

實體瘤

針對實體瘤（如肝細胞癌、胃癌、黑色素瘤、前列腺癌、卵巢癌等），目前雖然進行了數百項 CAR-T 臨床研究，比如 Mesothelin（29 項），HER2 和 GD（各 26 項），GPC3（23 項）CEA 和 CLDN 18.2（各 10 項），除去 CLDN 18.2（科濟 CT041）取得 ORR 48% 的療 效，其余靶點大多無應答[8]。

一. 可及性

目前 CAR-T 細胞治 療依然采用個體化生產，產能有限、生產周期長，且成本高昂，影響患者可及性。

二. 治 療相關副作用

作為免疫治 療產品，CAR-T 存在免疫相關一些副作用，包括細胞因子風暴（CRS）和神經毒性等，如上表統計 6 已經上市產品[5-7]。此外，脫靶毒性等也是不能忽略的問題。

三. 原發性耐藥

部分腫瘤細胞對于 CAR-T 治 療不敏感，無法產生消退。

四. 復發問題

從長時間看，細胞治 療產生消退的患者，如多發性骨 髓瘤 50% 以上會復發（無進展生存期小于 12 個月）[7]。

CAR-T 面臨的挑戰（Front. Immunol. 11:569117）[10]

五. 實體瘤

目前 CAR-T 治 療實體瘤，應答率和有效率都極低，相關機制討論中，涉及缺乏特異性腫瘤相關抗原，物理屏障阻隔 CAR-T 穿透入實體瘤內部，惡劣的腫瘤微環境誘導 CAR-T 功能耗竭等。

Molecular Therapy (2020)

除了以上挑戰之外，CAR-T 細胞的質量控制，臨床前試驗模型的缺乏等也是研發和臨床申報中廣泛面臨的問題。

一. 現貨型 CAR-T 解決可及性問題

現貨型 CAR-T 的優勢：

1.  可提前制備，直接使用；

2.  可批量生產，降低成本；

3.  產品質量與患者個體狀況無關。

現貨型 CAR-T 的開發策略：

宿主同種異體 T 細胞識別未修飾 T 細胞上不匹配的人類白細胞抗原(HLAs)，引起排斥反應。一些宿主 NK 細胞也可能感覺到不匹配的 T 細胞上某些宿主 HLAI 類分子的缺乏，促進排斥。現貨型 CAR-T 主要開發邏輯是阻斷移植排斥反應。

常用的策略包括：

▲ 敲除引起移植排斥反應的 HLA 分子；

▲ 過表達 HLA-E/G 或 CD47；

▲ 在現貨型 CAR-T 細胞上保留 HLA-C 和非經典的 HLAI 類分子；

▲ 主動的方法可以通過非選擇性抑 制宿主免疫(清除宿主淋巴細胞，包括 CD52/CD38 單克隆抗體和 FOLFOX)；

▲ 選擇性消除激活的同種異體反應性淋巴細胞。

現貨 CAR-T 開發策略[11]

但現貨型 CAR-T，基因敲除可能會引起 T 細胞染色體異常[13]，存在安全性問題，該技術的先驅 Cellectis 和 Allogene 多次被叫停臨床研究。

二. CAR-M、CAR-NK 等多種 CAR 細胞

除了 CAR-T 之外，使用 CAR 武裝另外一個免疫效應細胞（NK 細胞）也成為研究熱點。CAR-NK 有多種優勢，比如對移植排斥反應天然抵抗，可以使用臍帶血干細胞分化產生 NK 細胞，因而天然具有現貨型 CAR 細胞的特征；體內半衰期短，可以降低毒副作用的考量。不過，現在只有 30 多個臨床開展，還沒有獲得令人振奮的臨床結果，開發尚需時間。

Nat Rev Cancer . 2021 Mar;21(3):145-161.[13]

CAR-M 巨噬細胞是抗原遞呈細胞，CAR-M 增加抗原遞呈能力，激活體內的 T 細胞，從而發揮抗腫瘤活性。但其臨床有效性也同樣需要時間來檢驗。

無論是 CAR 基因改造還是在多種 CAR 細胞中尋找最 優答案，都對操作環境、設備及操作符合規范的要求尤其嚴格。Eppendorf  系列產品不僅可以實現 CAR-T 細胞產品研發生產中的安全性、質量可控性、產品工藝一致性及數據合規性，更有高效節能和用戶友好的特點。

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高密度細胞培養技術

助力細胞治 療工藝產業化

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細胞治 療產品的工藝開發及產業化挑戰

CAR-T 在血液腫瘤驚艷的表現，讓 CAR-T 無疑成為人類攻克癌癥的重要武器。針對 CMC 研發生產的諸多困境，在通過現貨型 CAR-T 降低成本，增加可及性，通過基因工程改造 CAR 增加實體瘤穿透性的不同策略嘗試中，Eppendorf 將與您攜手共同探索發展與未來。