紐約——SCIEX證明聲波激發(fā)液體進(jìn)樣Echo? MS系統(tǒng)與基于質(zhì)譜的肽定量工作流程的兼容性，從而將該系統(tǒng)應(yīng)用范圍從小分子工作流程擴(kuò)展到生物制藥開(kāi)發(fā)和大規(guī)模蛋白質(zhì)生物標(biāo)記物研究等應(yīng)用。

在2022年3月舉行的美國(guó)人類(lèi)蛋白質(zhì)組組織(US HUPO)年會(huì)上，來(lái)自位于馬薩諸塞州弗雷明翰的SCIEX科學(xué)家們提供了原始數(shù)據(jù)證明，該公司由生命科學(xué)巨頭Danaher所有，該公司的Echo MS系統(tǒng)可以每秒檢測(cè)多達(dá)三個(gè)樣本，應(yīng)用于肽段定量工作流程分析肽段，該工作流程利用穩(wěn)定同位素標(biāo)記并通過(guò)抗肽抗體（SISCAPA）捕獲肽段。

SCIEX液相和集成解決方案高級(jí)總監(jiān)Gavin Fischer表示，該公司現(xiàn)在開(kāi)始使用基于上述系統(tǒng)，開(kāi)發(fā)肽段定量應(yīng)用。他補(bǔ)充道，雖然其最初的目標(biāo)是生物制藥工作流程中的肽段定量，但也可以擴(kuò)展到蛋白生物標(biāo)記物研究。Fischer說(shuō)，公司研究人員在方法開(kāi)發(fā)過(guò)程中，使用了一組來(lái)源于SARS-CoV-2核衣殼蛋白的20個(gè)肽段。

Echo MS系統(tǒng)是SCIEX和Labcyte合作開(kāi)發(fā)的，該系統(tǒng)使用聲波激發(fā)液體處理將樣品快速?lài)娚涞劫|(zhì)譜儀中。SCIEX于2020年推出該系統(tǒng)，并已將其主要用于小分子分析方法。在美國(guó)HUPO上的詳細(xì)工作展示，旨在表明該系統(tǒng)也可用于分析肽段和蛋白質(zhì)等大分子。

Echo MS系統(tǒng)可能會(huì)引起蛋白生物標(biāo)記物研究人員的興趣，因?yàn)樗鼘⒃试S進(jìn)行超高通量實(shí)驗(yàn)。例如，F(xiàn)ischer指出，在探索使用該設(shè)備進(jìn)行肽段測(cè)定的第 一個(gè)項(xiàng)目中，SCIEX團(tuán)隊(duì)在含有約100個(gè)肽段的β-半乳糖苷酶蛋白質(zhì)的消化物中定量了一對(duì)β-半乳糖苷酶肽段。通過(guò)Echo MS系統(tǒng)，能夠在5小時(shí)內(nèi)對(duì)10260個(gè)樣本中的2種肽段進(jìn)行定量。如果使用傳統(tǒng)的液相色譜質(zhì)譜儀進(jìn)行同樣的實(shí)驗(yàn)，需要運(yùn)行大約7分鐘的液相色譜梯度，那么幾乎需要50天的全天候質(zhì)譜檢測(cè)工作。“我們正在研究高通量肽段定量，”Fischer說(shuō)，并指出研究人員將系統(tǒng)設(shè)置為每1.5秒分析一個(gè)樣本。“我們?cè)谡麄€(gè)樣品板上獲得了很好的重現(xiàn)性，很好的變異系數(shù)。”

SCIEX團(tuán)隊(duì)遵循最初的Echo MS系統(tǒng)工作流程，使用SISCAPA工作流程進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，該工作流程使用前期抗體富集目標(biāo)肽段來(lái)測(cè)定20個(gè)SARS-CoV-2肽段。SCIEX首席應(yīng)用科學(xué)家兼該項(xiàng)目負(fù)責(zé)人Christie Hunter在一封電子郵件中表示，SISCAPA是一種很有前途的利用Echo MS系統(tǒng)進(jìn)行蛋白定量的技術(shù)，因?yàn)榍捌诳贵w富集足以簡(jiǎn)化樣品，使其在無(wú)需液相分離的情況下即可進(jìn)行分析。

她指出：“這里的關(guān)鍵是找到正確的前期樣品制備方法，簡(jiǎn)化蛋白組學(xué)樣品，從而使液體流動(dòng)注射方法可行。” “目標(biāo)肽段的抗體富集非常引人注目方法，是與Echo MS系統(tǒng)配對(duì)的合適樣品制備工作流程，高度自動(dòng)化，執(zhí)行速度快，制備出高度富集的樣品，并且可以根據(jù)目標(biāo)蛋白的靈敏度進(jìn)行調(diào)整。” 她補(bǔ)充說(shuō)，這樣的工作流程“可以針對(duì)那些有大量蛋白質(zhì)組樣本需要分析并想要定量一小部分蛋白質(zhì)的實(shí)驗(yàn)室。”

Fischer說(shuō)，研究人員研究了20種肽段的定量限(LOQ)，發(fā)現(xiàn)該系統(tǒng)采用比較靈敏的肽段分析方法平均LOQ為1 fmol/μL，可將其目標(biāo)分析物定量至0.4 fmol/μL至3.7 fmol/μL。“[美國(guó)HUPO]的演示，非常有力地證明了我們的儀器可以做非小分子的工作，”他補(bǔ)充說(shuō)，公司現(xiàn)在計(jì)劃“在Echo MS系統(tǒng)上測(cè)試更大的分子和不同質(zhì)量的分子，并在更多的工作流程擴(kuò)展到更多的市場(chǎng)時(shí)，向客戶(hù)演示該系統(tǒng)實(shí)用性。”

當(dāng)被問(wèn)及該系統(tǒng)是否可以用于血漿中肽段的靶向定量等應(yīng)用時(shí)，F(xiàn)ischer表示，公司尚未通過(guò)實(shí)驗(yàn)證明這一點(diǎn)，但“有理論證據(jù)相信這個(gè)應(yīng)用可以實(shí)現(xiàn)。”他指出，SCIEX已證明該系統(tǒng)能夠定量血漿中的小分子。

他說(shuō)：“我們正致力于將[這項(xiàng)技術(shù)]應(yīng)用到更多不同的基質(zhì)中，并探索更大尺寸的包膜蛋白分析，從肽段到完整蛋白。” “我們將繼續(xù)打破所有這些研究方向的邊界。”公司將尋求將該技術(shù)應(yīng)用于其他市場(chǎng)，包括潛在的蛋白質(zhì)生物標(biāo)志物研究。

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參考文獻(xiàn)與信息

1.新聞來(lái)源：https://www.genomeweb.com/proteomics-protein-research/sciex-developing-peptide-quantitation-assays-using-acoustic-ejection

2. 獲取有關(guān)SCIEX Echo? MS系統(tǒng)的更多信息，請(qǐng)?jiān)L問(wèn) https://sciex.com.cn/products/integrated-solutions/Echo-ms

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