ELISA試劑盒的免疫測定
因為蛋白質與聚苯乙烯固相載體是通過物理吸附結合的,靠的是蛋白質分子結構上的疏水基團與固相載體表面的疏水基團間的作用,ELISA試劑盒這種物理吸附長短特異性的,受蛋白質的分子量、等電點、濃度等的影響,大分子蛋白質較小分子蛋白質通常含有更多的疏水基團,故更易吸附到固相載體表面。
如將多種抗原或含有多個抗原決定簇的抗原注入機體,則將由多系的B細胞產生相應的多種抗體,這些抗體均存在于免疫血清中。ELISA試劑盒含有抗體的血清稱為抗血清。免疫測定中所用的抗血清一般用抗原免疫兔、羊或馬制得。將免疫的脾細胞與小鼠腫瘤細胞融合,分離雜交瘤細胞,接種于小鼠腹腔,產生的腹水中含有濃度很高的單克隆抗體。
每一系B細胞只產生針對某一抗原決定簇的抗體。單克隆抗體通常用抗原免疫小鼠制備。產生抗體的B細胞可在體外與繁殖力強的腫瘤細胞融合成雜交瘤細胞。將單個雜交瘤細胞分離,在體內或體外培養而分泌的抗體單克隆抗體。單克隆抗體僅針對一種抗原決定簇,ELISA試劑盒具有很高的特異性。
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