本生闡述：小鼠γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒

　　一、實驗原理：

　　本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中小鼠γ干擾素(IFN-γ)水平。用純化的小鼠γ 干擾素(IFN-γ)捕獲抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被的微孔中依次加入小鼠γ干 擾素(IFN-γ)，再與 HRP 標記的檢測抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經過*洗滌后加底物 TMB 顯色。TMB 在 HRP 酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的小鼠γ干擾素(IFN-γ)呈正相關。用酶標儀在 450nm 波長下測定吸光度(OD 值)，通過標準曲線計算樣品中小鼠γ干擾素(IFN-γ)含量。

　　二、注意事項：

　　1. 試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。

　　2. 濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。

　　3. 各步加樣均應使用加樣器，并經常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在 5 分鐘內，如標本數量多，推薦使用排槍加樣。

　　4. 請每次測定的同時做標準曲線，做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本 OD 值大于標準品孔孔的 OD 值)，請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n 倍)后再測定，計算時請乘以總稀釋倍數(×n×5)。

　　5. 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

　　6. 底物請避光保存。

　　7. 嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.

　　8. 所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。

　　9. 本試劑不同批號組分不得混用。

　　三、操作程序

　　四、小鼠γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒產品說明

　　規格：96T、48T

　　小鼠γ干擾素試劑盒性能：

　　1.樣品線性回歸與預期濃度相關系數 R 值為 0.95 以上。 2.批內變異系數與批間變異系數應分別小于 10%和 10% 。

　　檢測范圍： 25 pg/mL - 800 pg/mL

　　靈敏度：小低檢測濃度小于 1.0 pg/mL

　　保存條件及有效期： 1.試劑盒保存： 2-8℃。 2.有效期： 6 個月

　　小鼠γ干擾素試劑盒本生一直視質量控制為企業的生命，追求企業競爭力的不斷提升。公司在經營中始終秉承：遵紀守法，嚴于律己，寬仁以待，敢于承擔的企業精神作為標準，以過硬的質量和優良的服務來維護和拓展市場，較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏，是我們的發展目標。本生!您信任的合作伙伴。我們愿與您真誠合作，共創美好的未來。

試驗原理：

　　本生闡述：Elisa試劑盒的溫育如何進行？
 

　　Elisa試劑盒的操作因固相載體的形成不同而有所差異，良好的儀器和正確的操作是ELISA檢測結果準確可靠的必要條件。國內醫學檢驗一般均用板式點。

　　Elisa試劑盒的操作步驟：

　　方法一：用于檢測未知抗原的雙抗體夾心法:

　　1. 包被：用0.05M  PH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質含量為1～10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml，4℃過夜。次日，棄去孔內溶液，用洗滌緩沖液洗3次，每次3分鐘。(簡稱洗滌，下同)。

　　2. 加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中，置37℃孵育1小時。然后洗滌。(同時做空白孔，陰性對照孔及陽性對照孔)。

　　3. 加酶標抗體：于各反應孔中，加入新鮮稀釋的酶標抗體(經滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃孵育0.5～1小時，洗滌。

　　4. 加底物液顯色：于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃10～30分鐘。

　　5. 終止反應：于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml。

　　6.   結果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結果：小鼠ELISA試劑盒反應孔內顏色越深，陽性程度越強，陰性反應為無色或較淺，依據所呈顏色的深淺，以“+"、“-"號表示。也可測O·D值：在ELISA檢測儀上，于450nm(若以ABTS顯色，則410nm)處，以空白對照孔調零后測各孔O·D值，若大于規定的陰性對照OD值的2.1倍，即為陽性。

　　18、對結果有疑問的樣品要用其它方法進行確證。

　　方法二：用于檢測未知抗體的間接法：

　　用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1～10μg/ml，每孔加0.1ml，4℃過夜。次日洗滌3次。加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時,洗滌。(同時做空白、陰性及陽性孔對照)于反應孔中，加入新鮮稀釋的酶標二抗體(抗抗體)0.1ml，37℃孵育30-60分鐘，洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。其余步驟同“雙抗體夾心法"的4、5、6。

　　其中還有一個步驟特別需要注意那就是洗滌：

　　洗滌在ELISA過程中雖不是一個反應步驟，但卻也決定著實驗的成敗。ELSIA就是靠洗滌來達到分離游離的和結合的酶標記物的目的。通過洗滌以清除殘留在板孔中沒能與固相抗原或抗體結合的物質，以及在反應過程中非特異性地吸附于固相載體的干擾物質。聚苯乙烯等塑料對蛋白質的吸附是普遍性的，而在洗滌時又應把這種非特異性吸附的干擾物質洗滌下來。

　　ELISA試劑盒本生一直視質量控制為企業的生命，追求企業競爭力的不斷提升。公司在經營中始終秉承：遵紀守法，嚴于律己，寬仁以待，敢于承擔的企業精神作為標準，以過硬的質量和優良的服務來維護和拓展市場，較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏，是我們的發展目標。本生!您信任的合作伙伴。我們愿與您真誠合作，共創美好的未來。

　　本生教你正確操作小鼠免疫球蛋白A(IgA)ELISA試劑盒

　　小鼠免疫球蛋白試劑盒檢測原理:

　　小鼠免疫球蛋白試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被對稱性免疫球蛋白A(IgA)抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經過溫育并洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成ZZ的黃色。顏色的深淺和樣品中的對稱性免疫球蛋白A(IgA)試劑盒呈正相關。用酶標儀在450nm   波長下測定吸光度(OD值)，計算樣品濃度。

　　小鼠免疫球蛋白試劑盒樣品收集、處理及保存方法:

　　1、血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。

　　2、血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

　　3、組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘。

　　4、取上清液保存------如果樣品不立即使用，應將其分成小部分-70 ℃保存，避免反復冷凍。

　　注：標本溶血會影響檢測結果，因此溶血標本不宜進行此項檢測。

　　小鼠免疫球蛋白試劑盒操作:

　　小鼠免疫球蛋白試劑盒使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產生加樣上的誤差。根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定，能使用復孔的盡量做復孔。

　　標本用標本稀釋液1：1稀釋后加入50ul于反應孔內。加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時。甩去孔內液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數增加一次。每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。甩去孔內液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數增加一次。每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。取出酶標板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應立即測定結果。在450nm波長處測定各孔的OD值。局限6號標準品以上的結果為非線性的，根據此標準曲線無法得到的結果。

　　小鼠免疫球蛋白試劑盒：

　　1、靈敏度：最小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為1.0 nmol/L。

　　2、特異性：不與其它細胞因子反應。

　　3、重復性：板內、板間變異系數均小于10%。

　　本生教你正確操作小鼠免疫球蛋白A(IgA)ELISA試劑盒,本生一直視質量控制為企業的生命，追求企業競爭力的不斷提升。公司在經營中始終秉承：遵紀守法，嚴于律己，寬仁以待，敢于承擔的企業精神作為標準，以過硬的質量和優良的服務來維護和拓展市場，較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏，是我們的發展目標。本生!您信任的合作伙伴。我們愿與您真誠合作，共創美好的未來。

　　小鼠尿蛋白試劑盒,小鼠(UP)ELISA檢測試劑盒本生生物公司供應：ELISA試劑盒,分光光度計，血清，熒光定量PCR耗材，移液器吸嘴，微量離心管，進口凍存管，細胞培養皿，培養板，培養瓶，吸頭，儀器及手套，色譜耗材，針頭過濾器。產品名稱：小鼠尿蛋白(UP)ELISA試劑盒貨號：BS-9205規格：96T/48T保存條件及有效期： 1、試劑盒保存：2-8℃。 2、有效期：6個月.小鼠尿蛋白試劑盒,小鼠(UP)ELISA檢測試劑盒

　　注：科研實驗專用。

　　小鼠腫瘤易感基因101試劑盒,小鼠(TSG101)ELISA檢測試劑盒

　　小鼠Clara細胞分泌蛋白試劑盒,小鼠(CCSP)ELISA檢測試劑盒

　　小鼠尿蛋白試劑盒,小鼠(UP)ELISA檢測試劑盒

　　小鼠多巴胺受體D3試劑盒,小鼠(DRD3)ELISA檢測試劑盒

　　小鼠可溶性CD86試劑盒,小鼠(sCD86)ELISA檢測試劑盒

　　小鼠孕烷X受體試劑盒,小鼠(PXR)ELISA檢測試劑盒

　　小鼠氧化型低密度脂蛋白試劑盒,小鼠(Ox-LDL)ELISA檢測試劑盒

　　小鼠核因子κB受體活化因子試劑盒,小鼠(Rank)ELISA檢測試劑盒

　　小鼠苯酚磺基轉移酶試劑盒,小鼠(SULT1A1)ELISA檢測試劑盒

　　小鼠丁酰膽堿酯酶試劑盒,小鼠(BCHE)ELISA檢測試劑盒

　　小鼠S100鈣結合蛋白A8/A9復合物試劑盒,小鼠(S100A8/A9)ELISA檢測試劑盒

　　小鼠血清淀粉樣蛋白A試劑盒,小鼠(SAA)ELISA檢測試劑盒

　　小鼠嗜鉻蛋白A試劑盒,小鼠(CgA)ELISA檢測試劑盒

　　小鼠3-磷酸甘油脫氫酶試劑盒,小鼠(GPDH)ELISA檢測試劑盒

　　小鼠凝血酶原試劑盒,小鼠(PT)ELISA檢測試劑盒本生生物公司供應：ELISA試劑盒,分光光度計，血清，熒光定量PCR耗材，移液器吸嘴，微量離心管，進口凍存管，細胞培養皿，培養板，培養瓶，吸頭，儀器及手套，色譜耗材，針頭過濾器。產品名稱：小鼠凝血酶原(PT)ELISA試劑盒貨號：BS-9416規格：96T/48T保存條件及有效期： 1、試劑盒保存：2-8℃。 2、有效期：6個月.小鼠凝血酶原試劑盒,小鼠(PT)ELISA檢測試劑盒

　　注：科研實驗專用，不用于臨床診斷。

　　小鼠磷酸膽堿試劑盒,小鼠(PC)ELISA檢測試劑盒

　　大鼠凋亡誘導因子試劑盒,大鼠(AIF)ELISA檢測試劑盒

　　大鼠脂多糖結合蛋白試劑盒,大鼠(LBP)ELISA檢測試劑盒

　　小鼠細胞外信號調節激酶試劑盒,小鼠(ERK)ELISA檢測試劑盒

　　小鼠單純皰疹病毒1糖蛋白D抗體IgG試劑盒,小鼠(HSV-1gDIgG)ELISA檢測試劑盒

　　小鼠凝血酶原試劑盒,小鼠(PT)ELISA檢測試劑盒

　　小鼠食欲素試劑盒,小鼠(Orexin)ELISA檢測試劑盒

　　小鼠抑絲蛋白2試劑盒,小鼠(PFN2)ELISA檢測試劑盒

　　小鼠UDP葡萄糖神經酰胺葡萄糖基轉移酶試劑盒,小鼠(UGCG)ELISA檢測試劑盒

　　小鼠硫酸轉移酶試劑盒,小鼠(SULT)ELISA檢測試劑盒

　　小鼠磷酸化真核細胞起始因子2α試劑盒,小鼠(p-eIF2α)ELISA檢測試劑盒

　　小鼠磷酸化P38試劑盒,小鼠(P-P38)ELISA檢測試劑盒

　　小鼠琥珀酸脫氫酶試劑盒,小鼠(SDH)ELISA檢測試劑盒

　　小鼠趨化因子33試劑盒,小鼠(CXCL33)ELISA檢測試劑盒

　　小鼠單純皰疹病毒1糖蛋白D抗體IgA試劑盒,小鼠(HSV-1gDIgG)ELISA檢測試劑盒

　　小鼠β細胞素試劑盒,小鼠(BTC)ELISA檢測試劑盒本生生物公司供應：ELISA試劑盒,分光光度計，血清，熒光定量PCR耗材，移液器吸嘴，微量離心管，進口凍存管，細胞培養皿，培養板，培養瓶，吸頭，儀器及手套，色譜耗材，針頭過濾器。產品名稱：小鼠β細胞素(BTC)ELISA試劑盒貨號：BS-2542規格：96T/48T保存條件及有效期： 1、試劑盒保存：2-8℃。 2、有效期：6個月.小鼠β細胞素試劑盒,小鼠(BTC)ELISA檢測試劑盒

　　注：科研實驗專用。

　　小鼠γ-分泌酶試劑盒,小鼠(γ-Secretase)ELISA檢測試劑盒

　　小鼠Tau蛋白試劑盒,小鼠(Tau)ELISA檢測試劑盒

　　小鼠谷丙轉氨酶試劑盒,小鼠(ALT)ELISA檢測試劑盒

　　小鼠脂褐質試劑盒,小鼠(Lipofuscin)ELISA檢測試劑盒

　　小鼠嗜酸粒細胞趨化蛋白Eotaxin試劑盒,小鼠2(Eotaxin2/CCL24)ELISA檢測試劑盒

　　小鼠正常T細胞表達和分泌因子試劑盒,小鼠(RANTES/CCL5)ELISA檢測試劑盒

　　小鼠巨噬細胞替代激活相關化學因子1試劑盒,小鼠(AmAC-1)ELISA檢測試劑盒

　　小鼠抗甲狀腺球蛋白抗體試劑盒,小鼠(ATGA/TGAB)ELISA檢測試劑盒

　　小鼠DNA甲基轉移酶3B試劑盒,小鼠(DNMT3B)ELISA檢測試劑盒

　　小鼠凋亡因子BAX試劑盒,小鼠(BAX)ELISA檢測試劑盒

　　小鼠半胱氨酸蛋白酶3試劑盒,小鼠(caspase3))ELISA檢測試劑盒

　　小鼠膽固醇調節元件結合蛋白試劑盒,小鼠(SREBP))ELISA檢測試劑盒

　　小鼠脂肪酸合成酶試劑盒,小鼠(FAS)ELISA檢測試劑盒

　　小鼠脫氫表雄酮硫酸酯試劑盒,小鼠(DHEA-S)ELISA檢測試劑盒

　　小鼠孕激素/孕酮試劑盒,小鼠(PROG)ELISA檢測試劑盒

　　小鼠睪酮試劑盒,小鼠(T)ELISA檢測試劑盒

　　小鼠游離睪酮試劑盒,小鼠(F-TESTO)ELISA檢測試劑盒

　　小鼠雄烯二酮試劑盒,小鼠(ASD)ELISA檢測試劑盒

　　小鼠雌三醇試劑盒,小鼠(E3)ELISA檢測試劑盒

　　小鼠17羥孕酮試劑盒,小鼠(17-OHP)ELISA檢測試劑盒

　　小鼠脂聯素試劑盒,小鼠(ADP)ELISA檢測試劑盒本生生物公司供應：ELISA試劑盒,分光光度計，血清，熒光定量PCR耗材，移液器吸嘴，微量離心管，進口凍存管，細胞培養皿，培養板，培養瓶，吸頭，儀器及手套，色譜耗材，針頭過濾器。產品名稱：小鼠脂聯素(ADP)ELISA試劑盒貨號：BS-2547規格：96T/48T保存條件及有效期： 1、試劑盒保存：2-8℃。 2、有效期：6個月.小鼠脂聯素試劑盒,小鼠(ADP)ELISA檢測試劑盒

　　注：科研實驗專用。

　　小鼠游離甲狀腺素試劑盒,小鼠(FT4)ELISA檢測試劑盒

　　小鼠甲狀腺素試劑盒,小鼠(T4)ELISA檢測試劑盒

　　小鼠三碘甲狀腺原氨酸試劑盒,小鼠(T3)ELISA檢測試劑盒

　　小鼠17羥孕酮試劑盒,小鼠(17-OHP)ELISA檢測試劑盒

　　小鼠雌三醇試劑盒,小鼠(E3)ELISA檢測試劑盒

　　小鼠雄烯二酮試劑盒,小鼠(ASD)ELISA檢測試劑盒

　　小鼠游離睪酮試劑盒,小鼠(F-TESTO)ELISA檢測試劑盒

　　小鼠睪酮試劑盒,小鼠(T)ELISA檢測試劑盒

　　小鼠孕激素/孕酮試劑盒,小鼠(PROG)ELISA檢測試劑盒

　　小鼠脂聯素試劑盒,小鼠(ADP)ELISA檢測試劑盒

　　小鼠血管生長素試劑盒,小鼠(ANG)ELISA檢測試劑盒

　　小鼠中性粒細胞趨化蛋白2試劑盒,小鼠(NAP-2/CXCL7)ELISA檢測試劑盒

　　小鼠17-酮類固醇試劑盒,小鼠(17-KS)ELISA檢測試劑盒

　　小鼠N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶試劑盒,小鼠(NAG)ELISA檢測試劑盒

　　小鼠促生長激素釋放激素試劑盒,小鼠(GHRH)ELISA檢測試劑盒

　　豬干擾素-γELISAkit,INF-γELISA檢測試劑盒本生(天津)健康科技有限公供應：豬干擾素-γELISAkit,INF-γELISA檢測試劑盒【貨號】BS-A8224【規格】96T/48T【產品名稱】豬干擾素-γ(INF-γ)ELISA試劑盒免費代測【保存條件】2-8℃。 【有效期】6個月本生生物公司供應：ELISA試劑盒,動物血清,熒光定量PCR耗材,移液器吸嘴,微量離心管,進口凍存管,細胞培養皿,培養板,培養瓶,進口吸頭,儀器及手套,色譜耗材,針頭過濾器,分光光度計。

　　豬干擾素-γELISAkit,INF-γELISA檢測試劑盒

　　注：產品僅用于科研實驗，不用于臨床!

　　猴可溶性血管細胞粘附分子1ELISAkit,sVCAM-1ELISA檢測試劑盒

　　猴可溶性細胞間粘附分子1ELISAkit,sICAM-1ELISA檢測試劑盒

　　猴γ干擾素ELISAkit,IFN-γELISA檢測試劑盒

　　猴胰島素ELISAkit,INSELISA檢測試劑盒

　　豬α葡萄糖苷酶ELISAkit,GAAELISA檢測試劑盒

　　豬干擾素-γELISAkit,INF-γELISA檢測試劑盒

　　豬鏈球菌2型抗體ELISAkit,Strep-2AbELISA檢測試劑盒

　　豬肺炎支原體抗體ELISAkit,MP-AbELISA檢測試劑盒

　　豬口蹄疫病毒抗體ELISAkit,FMDV-AbELISA檢測試劑盒

　　猴載脂蛋白B100ELISAkit,apo-B100ELISA檢測試劑盒

　　猴載脂蛋白A1ELISAkit,apo-A1ELISA檢測試劑盒

　　猴白介素6ELISAkit,IL-6ELISA檢測試劑盒

　　豬纖維連續蛋白受體ELISAkit,Fn-RELISA檢測試劑盒

　　豬副豬嗜血桿菌抗體ELISAkit,HPs-AbELISA檢測試劑盒

　　豬增殖誘導配體ELISAkit,APRILELISA檢測試劑盒

　　本生闡述：elisa操作步驟說明及注意事項

　　酶聯免疫吸附測定enzyme linked immunosorbent assay(簡寫ELISA)，指將可溶性的抗原或抗體結合到聚苯乙烯等固相載體上，利用抗原抗體結合專一性進行免疫反應的定性和定量檢測方法。要知道elisa操作步驟首先我們先了解一下elisa的原理是什么。

　　elisa的原理：

　　①使抗原或抗體結合到某種固相載體表面，并保持其免疫活性。

　　②使抗原或抗體與某種酶連接成酶標抗原或抗體，這種酶標抗原或抗體既保留其免疫活性， 又保留酶的活性。在測定時，把受檢標本(測定其中的抗體或抗原)和酶標抗原或抗體按不同的步驟與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體 上形成的抗原抗體復合物與其他物質分開，結合在固相載體上的酶量與標本中受檢物質的量成一定的比例。加入酶反應的底物后，底物被酶催化變為有色產物， 產物的量與標本中受檢物質的量直接相關，故可根據焰色反應的深淺刊物定性或定量分析。由于酶的催化效率很高，故可極大地放大反應效果，從而使測定方法達到 很高的敏感度。

　　elisa操作步驟：

　　方法一　用于檢測未知抗原的雙抗體夾心法:

　　1.　包被：用0.05M PH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質含量為1～10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml，4℃過夜。次日，棄去孔內溶液，用洗滌緩沖液洗3次，每次3分鐘。(簡稱洗滌，下同)。

　　2.　加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中，置37℃孵育1小時。然后洗滌。(同時做空白孔，陰性對照孔及陽性對照孔)。

　　3.　加酶標抗體：于各反應孔中，加入新鮮稀釋的酶標抗體(經滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃孵育0.5～1小時，洗滌。

　　4.　加底物液顯色：于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃10～30分鐘。

　　5.　終止反應：于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml。

　　6.　結果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結果：反應孔內顏色越深，陽性程度越 強，陰性反應為無色或極淺，依據所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號表示。也可測O·D值：在ELISA檢測儀上，于450nm(若以ABTS顯色，則 410nm)處，以空白對照孔調零后測各孔O·D值，若大于規定的陰性對照OD值的2.1倍，即為陽性。

　　方法二　用于檢測未知抗體的間接法：

　　用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1～10μg/ml，每孔加0.1ml，4℃過夜。次日 洗滌3次。加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時,洗滌。(同時做空白、陰性及陽性孔對照)于反應孔 中，加入新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗抗體)0.1ml，37℃孵育30-60分鐘，洗滌,最后一遍用DDW洗滌。其余步驟同“雙抗體

　　以上是elisa操作步驟，那么在elisa操作步驟的操作步驟中需要注意什么呢?下面是elisa實驗的注意事項：

　　1.正式試驗時，應分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件，待檢樣品應作一式二份，以保證實驗結果的準確性。有時本底較高，說明有非特異性反應，可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。

　　2.在elisa操作步驟中，進行各項實驗條件的選擇是很重要的，其中包括：固相載體的選擇、包被抗體(或抗原)的選擇、酶標記抗體工作濃度的選擇、酶的底物及供氫體的選擇

　　elisa試劑盒 本生(天津)健康科技有限公司是一家從事健康科技技術開發銷售的公司，本生生物公司在經營中始終秉承：遵紀守法，嚴于律己，寬仁以待，敢于承擔的企業精神作為標準。本生(天津)健康科技有限公司由具有行業背景和豐富市場經驗的業人士組成，于為生命科學研究域提供產品，為廣大科研工作者提供服務。 既能滿足研發類客戶對產品種類、包裝的特殊要求，也能滿足生產型企業從小試、中試到規模化生產各個階段的綜合需求。