1、前言

二甲基亞亞砜通常用作細(xì)胞和基因治 療（CGT）市場(chǎng)中的低溫保護(hù)劑。本試驗(yàn)的目的是在室溫下暴露于100%DMSO不同時(shí)間長(zhǎng)度（T＝0（對(duì)照）、24小時(shí)、7天和21天）后，通過(guò)機(jī)械試驗(yàn)（爆裂強(qiáng)度和拉伸強(qiáng)度）確定Aramus?聚酰胺袋材料的化學(xué)相容性。

2、測(cè)試產(chǎn)品

24個(gè)50 mL Aramus組件，帶有BarbLock?固定器。每個(gè)時(shí)間點(diǎn)測(cè)試三個(gè)平行樣（T=0，T=24小時(shí)，T=7天，T=21天）×兩次試驗(yàn)（拉伸和斷裂）。

零件號(hào)SU-2D-0.050S1-L12B，附錄1。

表1. 樣品接收和測(cè)試日期

3、測(cè)試方法

01 樣品填充

①確保Aramus樣品暴露于42kGy劑量的gamma射線照射。所有樣品均應(yīng)在明尼蘇達(dá)州查斯卡實(shí)驗(yàn)室通風(fēng)良好的通風(fēng)櫥中進(jìn)行裝入DMSO。并且留出六個(gè)樣品進(jìn)行拉伸和斷裂測(cè)試，這些將是T=0（對(duì)照）樣品。

②使用Luer鎖定注射器為每個(gè)樣品填充30mLDMSO溶液（100%）。足以覆蓋整個(gè)內(nèi)表面。

③填充的袋子應(yīng)保持在通風(fēng)良好的實(shí)驗(yàn)室通風(fēng)櫥中，直至?xí)r間間隔完成（24小時(shí)，7天，21天）。

④從樣品中排出DMSO，并進(jìn)行拉伸和斷破測(cè)試。

02

拉伸試驗(yàn)

Entegris WI-12906

03

突發(fā)測(cè)試

Entegris WI-03228

4、測(cè)試結(jié)果與結(jié)論

測(cè)試前，對(duì)所有樣品進(jìn)行伽馬輻射（42kGy）。拉伸和斷裂試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)下表和圖。

除了拉伸和斷裂數(shù)據(jù)外，還應(yīng)注意的是，在暴露于100%DMSO 21天后，目視檢查未發(fā)現(xiàn)變色。

測(cè)試了每個(gè)凍存袋子的兩個(gè)拉伸條，并從薄膜本身（而不是接縫）上取下，結(jié)果見(jiàn)圖1。

表2. 拉伸試驗(yàn)結(jié)果（ksi）

圖1. 斷裂拉伸能量試驗(yàn)結(jié)果

Aramus組件暴露在100%二甲基亞砜中似乎不會(huì)對(duì)拉伸特性產(chǎn)生很大影響，但目前尚不清楚第7天樣品斷裂時(shí)拉伸能下降的原因。圖2顯示了樣品的拉伸試驗(yàn)方向。

圖2. 樣品拉伸試驗(yàn)的方向

進(jìn)行斷裂測(cè)試以確定凍存袋在DMSO暴露后的斷裂壓力。內(nèi)部生產(chǎn)規(guī)范要求50mL凍存袋的斷裂壓力大于等于12psi。由于斷裂壓力大于12psi，所有Aramus凍存袋組件均獲得合格結(jié)果。斷裂試驗(yàn)結(jié)果如表3和圖3所示。

表3. 拉伸試驗(yàn)結(jié)果（psi）

圖3. DMSO暴露后的平均斷裂壓力測(cè)試結(jié)果

根據(jù)該試驗(yàn)結(jié)果，與未接觸DMSO的組件相比，Aramus組件暴露于100%DMSO長(zhǎng)達(dá)21天的時(shí)間似乎不會(huì)顯著降低拉伸強(qiáng)度或爆破壓力方面的機(jī)械特性。此外，在試驗(yàn)過(guò)程中未觀察到組件變色或泄漏。

5、設(shè)備/儀表

表4. 使用的設(shè)備/儀器

6、附錄1：用于DMSO測(cè)試的SU-2D-0.050S1-L12B組件

永合創(chuàng)信的樣本凍存解決方案將使您的樣本凍存管理工作變得異常輕松！

目前面臨樣本凍存中的常見(jiàn)問(wèn)題

A. 每次打開(kāi)超低溫冰箱取樣本，總是要翻找很久！

B．凍存幾年之后，翻出一些樣本，卻不知道是什么，也不知道是誰(shuí)存的，無(wú)法判斷是否還可以用。

C. 取出樣本再存的時(shí)候，發(fā)現(xiàn)位置被占用了，換個(gè)位置再存后，自己也不記得樣本放在哪了。

D. 將一批樣本用皮筋和塑料袋包扎找個(gè)空位置放進(jìn)去，感覺(jué)到冰箱空間利用率太低。

E. 用了凍存盒沒(méi)有用凍存架，所以取用Z里面的盒子要“翻騰很久很久”，超低溫冰箱開(kāi)門(mén)時(shí)間很長(zhǎng)。

F. 需要保存血液，組織塊，DNA等，混在一起怕搞亂，分開(kāi)了怕對(duì)不上。

G. 給樣本做了記號(hào)，但是記號(hào)筆筆跡模糊辨認(rèn)不清了。一臺(tái)冰箱幾萬(wàn)個(gè)標(biāo)本，稍不小心就搞錯(cuò)。

H．統(tǒng)計(jì)不出冰箱里確切存了多少標(biāo)本，整理報(bào)告讓人犯暈。

永合創(chuàng)信樣本凍存解決方案

一、永合創(chuàng)信凍存架特點(diǎn)：

1、wan美匹配市場(chǎng)上各品牌的全系列型號(hào)超低溫冰箱（Haier、Thermo、Sanyo、Effendorf、中科美菱、澳柯瑪、中科都菱等所有冰箱品牌）。

2、安全可靠

采用SUS304不銹鋼材質(zhì)，輕便防銹，適于低溫保存環(huán)境下使用。

3、結(jié)構(gòu)多樣

凍存架針對(duì)臥式、立式超低溫冰箱以及液氮罐等低溫設(shè)備，可以提供適于不同使用需求的凍存架。采用隔層的方式增加儲(chǔ)存物品數(shù)量，易于分辨物品種類。

4、可靠的質(zhì)量做工

完全機(jī)械化制作而成，機(jī)械化焊接、機(jī)械化打磨邊角、外觀精美，質(zhì)量可靠，操作方便。

二、永合創(chuàng)信凍存盒

1、全塑料、紙質(zhì)等不同材質(zhì)凍存盒，便于長(zhǎng)期或短期儲(chǔ)存；

2、所有凍存盒盒蓋上均有位置識(shí)別功能；

3、可高壓滅菌并在 -196°C 至 +121°C 溫度范圍內(nèi)使用的塑料盒；

4、凍存盒盒底部有隔板和通風(fēng)孔，便于液體流出和空氣流通；

5、提供多種規(guī)格，如81孔2英寸、100孔2英寸等。

三、永合創(chuàng)信凍存管

1、凍存管采用醫(yī)用聚丙烯（PP）為原料，是專用于儲(chǔ)存生物樣本的一次性實(shí)驗(yàn)室耗材；

2、管帽紋路易于旋轉(zhuǎn)蓋子；

3、管帽與管身都采用相同批次的型號(hào)的PP原料生產(chǎn)，因此相同的膨脹系數(shù)確保了任何溫度下都能密封；

4、大面積的標(biāo)記區(qū)域方便書(shū)寫(xiě)；

5、管體透明度極高，易于觀察樣本；

6、圓形底部設(shè)計(jì)便于傾倒液體，減少殘留。

四、凍存架參數(shù)

（來(lái)源：青島永合創(chuàng)信電子科技有限公司）

氮?dú)庾鳛榭諝獾闹饕煞郑?8%，V/V），具有很大的利用來(lái)源。其中一個(gè)主要用途是將氣態(tài)液氮進(jìn)行液化，進(jìn)行液氮儲(chǔ)存。

氣相和液相儲(chǔ)存

液氮，液態(tài)的氮?dú)?，惰性無(wú)色無(wú)味。液氮罐內(nèi)的液氮在-196攝氏度以下呈現(xiàn)的是液體狀態(tài)，一旦超過(guò)-196攝氏度以上就會(huì)沸騰變成氣體的狀態(tài)了，一旦低于-196攝氏度就會(huì)呈現(xiàn)結(jié)冰固態(tài)的現(xiàn)象，因此液氮的的狀態(tài)一定要控制在一定的溫度內(nèi)，常壓下液態(tài)氮?dú)鉃?196℃到-210℃之間。而同時(shí)存在容器中的氣態(tài)液氮在接近液體的層面大概溫度在-170℃到-180℃，而在容器口的層面液氮也有-80以下。因此當(dāng)進(jìn)行樣品保存時(shí)，分為兩種：一種液相儲(chǔ)存，即盛放樣品的容器要直接和液氮進(jìn)行接觸，這樣才能保證樣品的適當(dāng)溫度儲(chǔ)存；另外一種氣相儲(chǔ)存，樣品直接放入液氮罐的空氣中，這樣就直接能夠保證樣品（生物樣品等）的儲(chǔ)藏溫度的要求。

運(yùn)輸罐和儲(chǔ)存罐

儲(chǔ)存液氮罐，液氮保存時(shí)間長(zhǎng)，適用于靜置室內(nèi)長(zhǎng)時(shí)間保存活性生物材料。

運(yùn)輸液氮罐，一般體積和容量相對(duì)來(lái)說(shuō)更大，在內(nèi)膽加設(shè)了支承，耐運(yùn)輸和振動(dòng)，適用于室內(nèi)靜置和長(zhǎng)途運(yùn)輸兩用。

剩余液氮的檢測(cè)

當(dāng)使用液氮罐比較關(guān)心的液氮是否能夠使用多久，以及如何檢測(cè)液氮罐的剩余液氮的體積。由于液氮的超低溫和常規(guī)的室溫的巨大差距，因此液氮罐中的液氮受熱（雖然有真空隔離層）會(huì)產(chǎn)生揮發(fā)。液氮罐的日蒸發(fā)量也是衡量液氮罐好壞的一個(gè)重要參數(shù)，當(dāng)然這個(gè)數(shù)據(jù)只是液氮罐中液氮蒸發(fā)的平均量，實(shí)際使用過(guò)程中，液氮揮發(fā)量會(huì)多，然后逐漸降低。在使用過(guò)程中需要時(shí)刻觀察液氮的剩余量，在出廠前可以提前配制液氮高低位報(bào)警，保證能夠隨時(shí)提醒剩余液氮不足。如果沒(méi)有配制液位報(bào)警，可以在用實(shí)心塑料小棒或?qū)嵭男∧景舨迦胍旱薜撞?，過(guò)5-10s后取出，結(jié)霜的長(zhǎng)度既是液面高度（做好防護(hù)工作）。千萬(wàn)不要用空心棒或塑料管，以防液氮從管內(nèi)噴出傷人。當(dāng)液氮剩余不多時(shí)，液氮罐口會(huì)有冷凝水或者含有白色的結(jié)霜現(xiàn)象，此時(shí)需要及時(shí)補(bǔ)充液氮或者更換液氮罐。

因此根據(jù)自己的實(shí)際需求，選擇合適的液氮罐，才能保證實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行。