- 2025-01-21 09:31:43牛奶外泌體
- 牛奶外泌體是源自牛奶中的微小囊泡，直徑約為30-150納米。它們攜帶生物活性分子，如蛋白質、核酸和脂質，這些成分對人體健康具有潛在益處。牛奶外泌體具有天然的保護屏障，能穩定地傳遞其攜帶的生物活性物質。近年來，牛奶外泌體在營養與健康領域受到關注，被認為是一種新型的功能性食品成分，具有抗氧化、免疫調節等生物活性功能。
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牛奶外泌體問答
- 2023-05-11 11:20:33直播 | 深入外泌體: 冷凍電鏡下的新一代藥物遞送載體
- 細胞排出廢物的“垃圾桶”，到如今科研界熱度居高不下的寵兒，外泌體在某種意義上完成了質的飛躍。外泌體是細胞分泌到胞外的一種囊泡（Extracellular Vesicles，EVs），其大小為30-150nm，具有雙層磷脂膜結構，含有豐富的內含物（包含蛋白質、核酸等多種活性生物分子）。外泌體應用于疾病診斷、藥物裝載等方面，它穿透性極強、吸收更佳、低免疫原性，使得它成為了非常優質的“活性物質遞送系統”。外泌體由蛋白質、核酸、脂質組成，含有較高水平的膽固醇、鞘磷脂及飽和脂肪酸。相比其他載體，外泌體在遞送藥物方面有著顯而易見的優勢：①外泌體的安全性非常高；②外泌體有非常好的靶向性潛力；③外泌體具備工程改造潛力；④外泌體有優秀的多分子裝載能力。藥物遞送系統（DDS）的表征是新藥研發致關重要的一個環節，反應DDS 的特性。冷凍電鏡是外泌體直觀表征的不二利器，通過將外泌體樣本快速冷凍，可以獲得外泌體近生理狀態下形貌信息細節，直接表征多項指標；還可以通過冷凍電子斷層掃描技術獲得外泌體近生理狀態下的3D結構，為新藥開發打開納米世界的大門。隨著冷凍電鏡技術的不斷發展，已經突破分辨率極限，達到原子級別。冷凍電鏡技術對外泌體的探究越來越細致，為了更深入的走進外泌體，了解冷凍電鏡下的新一代藥物遞送載體，藥融圈聯合賽默飛共同邀請到蘇州唯思爾康科技有限公司SVP何新軍以及賽默飛世爾科技材料與結構分析業務拓展經理劉靖怡2位行業專家，于2023年5月18日做客線上直播間，揭開外泌體的神秘面紗。
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- 2024-01-15 17:30:19包涵體蛋白復體常見十大問題解析
- 在生命科學領域中，包涵體復體的研究占據了重要的地位。但隨著研究的深入，一些問題逐漸浮現。本文將對包涵體復體研究中常見的挑戰進行解析，以及為研究者提供一些解決思路。 ①包涵體復性原則：低濃度，平緩梯度，低溫。 ②怎樣洗滌包涵體？通常的洗滌方法一般是洗不干凈的，可以先把包涵體用6M鹽酸胍溶解充分，過濾除去未溶解的物質，注意留樣跑電泳，然后用水稀釋到4M,離心把沉淀和上清分別跑電泳，如此類推可以一直稀釋到合適的濃度，可以找到一個合適去除雜質的辦法，其實這就是梯度沉淀的方法，比通常的直接洗脫效果好。 ③對于尿素和鹽酸胍該怎么選擇尿素和鹽酸胍屬中強度變性劑，易經透析和超濾除去。它們對包涵體氫鍵有較強的可逆性變性作用，所需濃度尿素8-10M，鹽酸胍6-8M。尿素溶解包涵體較鹽酸胍慢而弱，溶解度為70-90%，尿素在作用時間較長或溫度較高時會裂解形成氰酸鹽，對重組蛋白質的氨基進行共價修飾，但用尿素溶解具有不電離，呈中性，成本低，蛋白質復性后除去不會造成大量蛋白質沉淀以及溶解的包涵體可選用多種色譜法純化等優點，故目前已被廣泛采用。 鹽酸胍溶解能力達95%以上，且溶解作用快而不造成重組蛋白質的共價修飾。但它也有成本高、在酸性條件下易產生沉淀、復性后除去可能造成大量蛋白質沉淀和對蛋白質離子交換色譜有干擾等缺點。 ④8M尿素溶解的包涵體溶液應如何保存?在4度放置半個月，都沒什么問題 。在室溫放置超過48小時，可能會對目的蛋白有影響，因為尿素在堿性條件下可使一些氨基酸酰基化，所以早些處理BI溶液比較好。 ⑤復性時的蛋白濃度一般使用濃度為0.1-1.0mg/ml，太高的濃度容易形成聚體沉淀，太低的濃度不經濟，而且很多蛋白在低濃度時不穩定，很容易變性。 ⑥蛋白復性后濃度低蛋白可能是在復性的過程中發生降解了。 可以將復性好的蛋白濃縮一下泡膠看看。復性過程一般都是低濃度蛋白，需要保證分子間有足夠的折疊空間。一些未正確折疊的蛋白就存在于沉淀中，可能沉淀看不出來，復性后的蛋白高速離心看看。 ⑦復性中蛋白析出是怎么回事？該怎么處理？出現蛋白析出，肯定是條件變化太劇烈了。 復性應該采取復性液濃度和PH值逐漸變化的方法，例如根據包涵體的溶液成分，每隔1個PH或濃度值配置一種溶液，逐步透析到正常。此外透析時必須濃度極低，條件溫和，使蛋白質能夠正確折疊。但是復性的比率應該很低。 若加變性劑尿素可加到2M，鹽酸胍可加到1-1.5M； 另外可將甘油濃度增加，范圍可在≤30%，且在復性樣品中也可加適量甘油。 ⑧復性效果的檢測根據具體的蛋白性質和需要，可以從生化、免疫、物理性質等方面對蛋白質的復性效率進行檢測。 凝膠電泳：一般可以用非變性的聚丙烯酰胺凝膠電泳可以檢測變性和天然狀態的蛋白質，或用非還原的聚丙烯酰胺電泳檢測有二硫鍵的蛋白復性后二硫鍵的配對情況。光譜學方法：可以用紫外差光譜、熒光光譜、圓二色性光譜（CD）等，利用兩種狀態下的光譜學特征進行復性情況的檢測，但一般只用于復性研究中的過程檢測。色譜方法：如IEX、RP-HPLC、CE等，由于兩種狀態的蛋白色譜行為不同。生物學活性及比活測定：一般用細胞方法或生化方法進行測定，較好的反映了復性蛋白的活性，值得注意的是，不同的測活方法測得的結果不同，而且常常不能完全反映體內活性。黏度和濁度測定：復性后的蛋白溶解度增加，變性狀態時由于疏水殘基暴露，一般水溶性很差，大多形成可見的沉淀析出。免疫學方法：如ELISA、WESTERN等，特別是對結構決定簇的抗體檢驗，比較真實的反映了蛋白質的折疊狀態。 ⑨變性的融合蛋白可以制備多抗或者單抗嗎？變性蛋白只是天然蛋白伸直的產物，用來免疫動物具有更強的抗原性。只是天然蛋白中被包在內部的抗原決定簇也會暴露出來，如果用該變性抗原制備的抗體來檢測變性抗原是可以的，如果用來檢測天然蛋白，可能會有假陽性。做單抗也可以，同樣道理，篩選出的單抗可能對抗的抗原決定簇處于天然抗原的內部，是否能用還要看將來該單抗用來干什么。 ⑩純化后的可溶性融合蛋白可以直接用于制備多抗嗎？免疫動物要求抗原體種盡量小。在這種小體積的情況下，緩沖液里的小分子成分只要沒毒影響就不大，可以不用考慮。 更多蛋白復體詳情可以上義翹神州網咨詢！
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- 2019-07-22 13:29:43外泌體研究又一利器 — IZON外泌體分離鑒定系統
- 近幾年外泌體研究火熱，文章數量一直居高不下，國內的外泌體研究起步較晚，但從趨勢來看，國內的外泌體研究正在逐漸加速發展。越來越多的研究者將外泌體與轉化醫學聯系起來，特別是液體活檢方向，相信假以時日，外泌體必然為疾病的診斷與ZL帶來重大改革。廣州云星科學儀器有限公司順應科研需求，代理了IZON公司針對外泌體研究而開發的利器 — 外泌體分離鑒定系統，這將為外泌體的研究帶來全新的視角。 TRPS—可控電阻式脈沖傳感技術Tunable Resistive Pulse Sensing（TRPS )是目前可用于納米粒子表征的功能Z強大的技術，也是納米粒子研究、發展和質控中重要的工具，該技術的應用在納米醫學和細胞外囊泡研究的領域中尤為突出。IZON公司所開發的外泌體分離鑒定系統正是基于該原理。 TRPS技術基于阻抗原理，與激光無關。當充滿電解液的納米孔上下兩邊施加一定的電壓時，納米孔內會產生離子電流。當顆粒通過納米孔會取代一定的電解液增加電阻，繼而產生電阻脈沖信號，該脈沖信號大小與顆粒的體積成正比。TRPS 技術應用鑒于分子尺寸已能得到測定且亞微尺寸受到人們較高的關注度，TRPS目前主要關注范圍是亞微米的樣品，檢測對象是尺寸范圍為40 nm -10 μm的顆粒。顆粒大小和濃度的檢測通過使用已知尺寸和濃度的校正顆粒來實現。當顆粒流經納米孔，會產生一個電阻脈沖信號，通過該信號和校正顆粒的對比，來實現顆粒特征的逐個測定。1. 顆粒大小和濃度的檢測通過使用已知尺寸和濃度的校正顆粒來實現。當顆粒流經納米孔，會產生一個電阻脈沖信號，通過該信號和校正顆粒的對比，來實現顆粒特征的逐個測定。2. 顆粒流速與顆粒濃度成正比，所以可以準確測定不同尺寸的顆粒濃度。于此同時，可以逐個測得每個顆粒的尺寸。TRPS的核心理念在于可以同時提供準確的顆粒濃度和顆粒尺寸分布。 1 尺寸測定TRPS中的離子電流電阻式脈沖單顆粒通過納米孔時的，可視離子電流“脈沖”單電流脈沖特寫展示特征脈沖形狀TRPS現可用于測定納米顆粒和不同來源的EVs的真實尺寸分布。請注意下圖中的縱軸代表不同尺寸范圍內顆粒的個數濃度，而不是比率。TRPS技術是目前唯yi可以實現可靠顆粒測定的方法 。任何高可信度的顆粒研究項目或者跟顆粒相關的規定都需要數據具有高可靠性和易得性。TRPS能夠提供高質量的測量數據（如尺寸分布及顆粒濃度）并有望推動納米顆粒研究的快速發展。 2 濃度測定 TRPS技術能獲得非常準確的濃度信息：顆粒速度與濃度成正比關系，與顆粒組成無關，因此，一定尺寸范圍內的顆粒濃度（Cmin-Cmax）可通過已知濃度的標準曲線計算得到。對于一張完整的數據圖，需要同時提供顆粒濃度和尺寸分布，然而許多應用中，提供更簡單的數據也同樣合適。TRPS利用簡單且可驗證的方法提供準確、可靠的濃度。 3 尺寸電荷測定，包括Zeta電勢TRPS技術通過分析單個顆粒在不同驅動力下電阻式脈沖的持續時間，跟已知尺寸、表面電荷和個數濃度的標準樣品比較，來逐個測定顆粒的表面電荷。每個脈沖的寬度與顆粒穿過錐形孔有關，通過分析脈沖寬度，可以獲得每個顆粒的速度。通過測定顆粒速度，可以獲得每個顆粒的電泳淌度，意味著可以同時獲得顆粒的尺寸和電荷信息。跟大多數電荷測定技術一樣，電泳淌度可以簡單的轉換為Zeta電勢。 上圖展示了不同腦脊液樣品EVs的尺寸和帶電情況，表明TRPS技術提供的EVs詳細的電荷分析是一個十分實用的研究工具。來源于健康人樣品（綠點）的顆粒平均Zeta電勢為-17 mV，而來自于疾病樣品（紫點）則為-15 mV（顆粒均溶于PBS溶液）。（校正顆粒以橙色顯示） 外泌體分離鑒定系統qNano qNano 利用可控電阻式脈沖感應（TRPS）原理進行顆粒測定。功能強大且測量jing準，取代了舊式激光測量方法。單一顆粒測量具有Z高精度和可重復性，可用于測量：? 尺寸及真實粒徑分布? 特定尺寸范圍內的顆粒濃度? 基于逐個顆粒的顆粒表面電荷測定 主要應用：細胞外囊泡：外泌體|微粒|全血細胞|血小板納米醫學：脂質體|納米/微泡|高分子藥物輸送|能顆粒|免疫檢測功能顆粒病毒和疫苗特性描述：病毒|疫苗|細菌 qEV 細胞外囊泡（外泌體）分離柱 多種規格分離柱可供選擇，實驗體積從0.1ml到100ml，滿足不同實驗需求，Z大程度降低實驗操作成本。AFC自動收集器取代手工收集濾液，用于自動定量收集分離柱中流出的液滴,達到把不同活性組分裝到不同試管中去的目的。它將進一步提高EV隔離的可重復性，并為您節省手動觀察份數所需的時間。很多研究人員懷疑自己養的細胞能不能做外泌體研究，其實不用擔心，外泌體已知是細胞之間傳遞信息的信使，細胞沒有獨立存在的，任何表型的改變（腫瘤侵襲，干細胞修復，組織再生，胚胎發育等）都是經過細胞傳遞，外泌體介導的。相信這套外泌體分離鑒定系統能夠給您的研究帶來意想不到的結果！ （來源：廣州云星科學儀器有限公司）
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- 2025-02-01 09:10:16金相顯微鏡能不能測粉體
- 金相顯微鏡能不能測粉體？ 金相顯微鏡作為一種用于觀察金屬樣品的顯微分析工具，廣泛應用于材料科學和金屬研究中。它能夠通過對金屬表面的觀察，幫助研究人員了解金屬的組織結構、相組成及晶粒大小等重要信息。當我們將其應用到粉體測量上時，是否能獲得理想的效果？本文將深入探討金相顯微鏡能否有效測量粉體，并分析其中的技術挑戰與局限性。 金相顯微鏡的基本原理與應用 金相顯微鏡通過將樣品制備成適合觀察的薄片，借助不同的顯微鏡鏡頭和光源進行觀察，從而獲取材料的微觀結構信息。通常，這類顯微鏡配備了高分辨率的光學系統，能夠清晰呈現金屬材料表面不同相區的結構特征，廣泛應用于金屬鑄造、焊接、熱處理等領域，幫助研究者了解材料的性能變化。 粉體的特殊性與金相顯微鏡的適應性 粉體由于其顆粒形態的特殊性，相較于常規的金屬樣品，更難通過傳統金相顯微鏡進行觀察。粉體材料的顆粒大小、形狀、分布等特征對于顯微鏡的觀察提出了更高的要求。金相顯微鏡主要適用于平整、穩定的固體表面觀察，而粉體由于其顆粒形態和尺寸的不規則性，難以獲得清晰的觀察結果。粉體樣品的制備過程通常需要將其制成薄片或者通過特殊處理固定，才能進行顯微鏡分析。 金相顯微鏡在粉體分析中的局限性 粉體的顆粒尺寸通常較小，且形狀不規則，傳統金相顯微鏡的分辨率和觀察角度可能無法完全呈現顆粒的全貌。金相顯微鏡在觀察粉體時需要樣品表面平整，如果沒有經過特殊的樣品制備，觀察效果可能會受到影響。再者，由于金相顯微鏡主要側重于觀察金屬的微觀結構，而粉體的形態和表面特性常常需要借助其他顯微技術（如掃描電子顯微鏡 SEM）來獲得更為的分析結果。 結論 金相顯微鏡雖然可以對粉體進行一定程度的觀察，但由于粉體的顆粒特性、樣品制備難度及金相顯微鏡的局限性，它并非粉體分析的佳選擇。若要獲得更高精度的粉體表征，推薦使用掃描電子顯微鏡（SEM）等其他更為適合粉體分析的儀器。
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滬公網安備 31011502008050號